بررسي آثار استئوژنز داروي هوميوپاتي سيمفيتوم بر سلول‌‌هاي بنيادي مزانشيمي

Evaluation the possibility of induction osteogenic differentiation of mesenchymal stem cells using homeopathy medicine symphytum

بازسازي استخوان يك پروسه فيزيولوژيك بسيار منظم است كه طي درمان طبيعي در شرايط نرمال رخ مي‌‌دهد. اما گاه در شرايط سخت باليني ناكارآمد عمل مي‌كند. يكي از راهكارهاي درماني استفاده از روش‌هاي سلول درماني با استفاده از سلول‌هاي بنيادي و عوامل القا كننده تمايز به استخوان است. در اين مطالعه اثر داروي هوميوپاتي سيمفيتوم بر القاي تمايز سلول بنيادي مزانشيمي به استئوبلاست مورد بررسي قرار گرفت. مواد و روش‌‌ها سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي مغز استخوان، از استخوان ران پاي رت استخراج شدند. بررسي ميزان سميت داروي سيمفيتوم در طول زمان بر روي سلول‌‌هاي بنيادي مزانشيمي با استفاده از تست MTT انجام شد. ميزان تمايز استخواني سلول‌‌هاي بنيادي مزانشيمي بعد از 7 و 21 روز مجاورت با سيمفيتوم با پوتنسي‌‌هاي مختلف با استفاده از تست رنگ‌‌آميزي آليزارين رد ارزيابي گرديد و با محيط استاندارد القاي تمايز مقايسه شد. يافته‌‌ها نتايج تست MTT نشان داد كه سيمفيتوم مي‌تواند بصورت وابسته به توان و زمان ميزان رشد و تكثير سلولي را كاهش دهد بگونه‌‌اي كه اين كاهش در پوتنسي C200 بسيار شاخص بود و لذا در ادامه از پوتنسي‌هاي پايين‌‌تر استفاده شد. نتايج آليزارين رد نشان داد كه همه نمونه‌ها افزايش معني‌‌داري در ميزان تمايز نسبت به نمونه كنترل منفي، ايجاد مي‌كنند. بيشترين شدت القاي تمايز به استخوان در نمونه‌هاي مجاور شده با سيمفيتوم با پوتنسيC6 مشاهده شد. نتيجه‌‌گيري نتايج اين مطالعه نشان مي‌دهد كه داروي سيمفيتوم مي‌تواند پس از انجام تست‌‌هاي تكميلي، بعنوان جايگزين مناسبي با اثر بيشتر، سميت كمتر و هزينه بسيار كمتر براي محيط‌هاي استاندارد القاي تمايز به استخوان پيشنهاد گردد.

Introduction and Aims: Although bone regeneration is a complex and systemic physiological process which happened during regeneration remedy, the treatment of bone defect has been a problem faced by the clinical situation. At present, cell therapy is commonly used to treat bones defects. The patterns of cell therapy using stem cells and osteogenic inducing mediators. In the present study, the ability of homeopathy medicine symphytum to induce cell differentiation of rat bone marrow-drivedmesenchymal stem cells (rat’s BM-MSCs) into osteoblasts was studied. Material and methods: Rat’s bone marrow mesenchymal stem (rBM-MSCs) were isolated from rat’s bone marrow. Cytotoxic effects of homeopathic symphytum on BM-MSCs was evaluated by MTT assay. Intracellular calcification was studied with alizarin red staining after 7 and 21 days of osteogenic treatments. Result: MTT assay results attended homeopathic symphytum could decrease cells growth and proliferation independence of time and potency, 200C has high cytotoxicity (28% viable cells) so that lower potencies (30 C, 12 C, 6C) were used for next experiments. Alizarin red staining showed all the test groups could induce significant variation with negative control. The lowest potency (6 C) was significantly increased the differentiation of mesenchymal stem cells to osteoblast cells and synergism groups in compare with test group have lower color intensity. Conclusion: According to this finding, Homeopathic symphytum could enhance osteogenic differentiation of rBM-MSCs and could be considered as a safe alternative for standard osteogenic medium.