بررسي ژنوتيپ سيستم گروه خوني Kell در بيماران تالاسمي داراي آلوآنتي بادي

Study of Kell blood group genotype in alloimmiunized thalassemia patients

سابقه و هدف آلوايميونيزاسيون، برجسته ترين عارضه باليني در بيماران تالاسمي محسوب مي گردد و Anti-K فراوان ترين آنتي بادي در اين بيماران مي باشد. لذا ارزيابي دقيق اين آنتي ژن مي تواند سبب كاهش چشمگير موارد آلو- ايميونيزاسيون گردد. روش هاي ژنوتيپ با غلبه بر محدوديت هاي روش سرولوژيك، سبب تسهيل تعيين گروه در اين بيماران شده و مي تواند راهنماي خوبي جهت شناسايي واحد هاي خون سازگار باشد. در اين بررسي آنتي ژن هاي K و k با روش هاي سرولوژيك و مولكولي بررسي شده و نتايج مورد مقايسه قرار گرفتند. مواد و روش ها در اين مطالعه توصيفي، تعداد 200 نمونه خون كامل به صورت تصادفي از بيماران تالاسمي داراي آلوآنتي بادي درمانگاه تالاسمي بزرگسالان ظفر جمع آوري و فنوتيپ آنتي ژن هاي K و k براي تمامي نمونه ها تعيين گرديد. PCR-SSP براي تمامي نمونه ها انجام شد. در موارد عدم تطابق نتايج ژنوتيپ و سرولوژي، نتايج به وسيله PCR-RFLP و تعيين توالي DNA تاييد شدند. يافته ها در اين مطالعه Anti-K (28%) شايع ترين آنتي بادي شناخته شد. نتايج ژنوتيپ نشان داد كه از 200 نمونه مورد بررسي، 192 بيمار(96%) داراي ژنوتيپ KEL*02/KEL*02 و 8 بيمار(4%) KEL*01/KEL*02 بودند. با مقايسه نتايج ژنوتيپ و فنوتيپ، 8 مورد ناسازگاري مشاهده شد كه در تمامي موارد صحت نتايج ژنوتيپ با تعيين توالي DNA تاييد گرديد. نتيجه گيري اين مطالعه نشان داد كه آنتي بادي ها عليه آنتي ژن K هم چنان در بيماران تالاسمي به ميزان بالايي پيدا مي شود. يافته ها بيان نمود كه ژنوتيپ مولكولي RBC نسبت به فنوتيپ سرولوژيك برتري دارد و به خصوص در بيماراني مانند بيماران تالاسمي كه دفعات زيادي خون مي گيرند، جايگزين مناسب و روش قابل اعتمادتري است.

Background and Objectives Alloimmunization is the most serious problem in thalassemia patients and Anti-K is the most prevalent antibody in these patients. So accurate identification of this antigen can significantly decrease the rate of alloimmunization. Serological phenotyping is usually not reliable in multitransfused patients. Molecular genotyping can overcome limitations of hemagglutination assays, resolve discrepant serologic typing and guide RBC selection for them. In this regard, we intended to determine the K and k among alloimmunized thalassemia patients using molecular methods and compare the results between different methods. Materials and Methods In this descriptive study, a total of 200 blood samples were collected randomly from alloimmunized thalassemia patients of Tehran Adult Thalassemia Clinic. The phenotype of all samples was determined for K and k. PCR-SSP was performed for all samples. The discrepant results between the phenotype and genotype were re-evaluated by PCR-RFLP and were confirmed by DNA sequencing. Results Sixty-three (28%) out of 200 patients developed Anti-K. Molecular typing of samples for K and k antigens revealed 96% (192 patients) KEL*02/KEL*02 and 4% (8 patients) KEL*01/KEL*02 among our samples. Discrepancy between the serology and genotyping results were detected in 8 cases that in all cases correction of genotype results was confirmed by DNA sequencing. Conclusions This study demonstrates that antibodies against K antigen continue to develop in thalassemia patients at high rate. Our findings suggest that RBC molecular genotyping is superior to serological phenotyping and is a good alternative and more reliable method especially in multi transfusion patients such as thalassemia patients.