طراحي و ساخت RNA تداخل‌گر( RNAi) باهدف كاهش ‌بيان ژن كانديد درگير در ‌سرطان

زمينه: سرطان يكي از مهم‌ترين عوامل تهديد‌ كننده سلامت محسوب مي‌شود. توسعه روش‌هاي درماني مبتني بر فرايند‌هاي RNA هاي تداخل‌گر (RNAi) نتايج قابل ‌قبولي را به دنبال داشته‌ است. يكي از مهم‌ترين مشكلات سيستم‌هاي siRNA، پايداري كم آن مي‌باشد. از جمله راهكارهاي غلبه بر اين ضعف، معرفي انواع مختلفي از RNAهاي سنجاق‌سري يا shRNA بوده‌است. ژن OCC-1 (Overexpressed in Colon Carcinoma) داراي رونوشت‌هاي متعددي مي‌باشد كه به عنوان مشخصه سرطان كولوركتال در نظر گرفته شده است. اين ژن نقش مهمي در ايجاد و پيشرفت سرطان كولوركتال از طريق مسيرهاي پيام‌رسان سلولي دخيل در تكثير سلولي دارد. در تحقيق حاضر از روش RNA تداخل‌گر يا RNAi به منظور كاهش بيان رونوشت‌ ويژه‌اي از ژنOCC-1 استفاده ‌شده است. روش كار:‌ سازه‌خاموش‌گر طراحي شد و سپس در ناقل بياني pRNA-H1.1/Neo كه داراي پروموتر براي RNApolIII مي‌باشد، كلون گرديد. پلاسميد در رده‌ سلولي سرطان ‌كولوركتال ترانسفكت گرديد و بيان رونوشت OCC-1 در زمان‌هاي 24 و 72 ساعت بعد از ترانسفكشن نسبت به نمونه كنترل با روش Real-time PCR مورد بررسي قرار گرفت‌. يافته ها: بيان رونوشت OCC-1 در زمان 72 ساعت بعد از ترانسفكشن، نسبت به نمونه ‌كنترل حدود 25 درصد كاهش يافت. نتيجه‌گيري: نتايج نشان مي‌دهد سازه shRNA طراحي شده به صورت موفقيت‌آميزي باعث كاهش بيان ژن مورد هدف شده است كه با توجه به نتايج مي‌توان از آن در مطالعات آينده به منظور كشف تاثير اين رونوشت بر ايجاد يا پيشرفت سرطان‌ كولوركتال، ‌استفاده نمود.