مطالعه ميزان بيان NF-KB و MAPK در كشت همجوار باكتري استرپتوكوكوس ترموفيلوس با سلول هاي سرطاني كولون HT29

The Study of NF-KB and MAPK Genes Expression in HT29 Colon Cancer Cell line Co-Cultured with Streptococcusthermophilus

زمينه پروبيوتيك‌ها باكتري‌هاي فلور نرمال هستند. تاكنون مكانيسم‌هاي مختلفي مثل تحريك سيستم ايمني، تعديل تركيب جمعيت فلور نرمال دستگاه گوارشي، ادراري و تناسلي و جلوگيري از فعاليت آنزيم‌هاي سرطان‌زاي مدفوعي براي اثرات پروبيوتيك‌ها شناسايي شده است. با توجه به تراكم بالاي فلورنرمال در روده و ماهيت اكثرا تك‌گير سرطان‌هاي كولوركتال، اين سرطان‌ها جزو كانديدهاي اصلي درمان با پروبيوتيك‌ها محسوب مي‌شوند. در اين مطالعه ميزان بيان ژن‌هاي NF-KB و MAPK در كشت همجوار باكتري Streptococcus thermophilus با سلول‌هاي سرطاني كولون HT29 مورد بررسي قرار گرفت. روش‌كار از كشت باكتري‌ها، مايع رويي و عصاره باكتريايي تهيه شده و سلول‌ها توسط اين مواد تيمار شدند. در ادامه اثرات سميت سلولي عصاره سلول باكتري روي رده سلولي HT29 در مدت زمان 24 ساعت با استفاده از روش MTT بررسي شد. همچنين ميزان بيان ژن‌هاي NF-kB و MAPK در رده سلولي HT29 با استفاده از روش Real Time PCR مورد بررسي قرار گرفت و تجزيه داده‌ها از آزمون آماري تجزيه واريانس يك‌طرفه استفاده شد. يافته‌ها نتيجه آزمايش MTT نشان داده شده است كه غلظت 05/0 =OD بيشترين كشندگي در 4 ساعت را دارد. باكتري‌ استرپتوكوكوس ترموفيلوس ميزان بيان ژن‌هاي NF-kB را به‌ شدت كاهش و بيان MAPK را افزايش مي‌دهد و باعث آپوپتوز در سلول‌هاي سرطاني مي‌گردد. نتيجه‌گيري نتيجه‌گيري كه از اين تحقيق بدست آمد نشان داد كه از باكتري‌هاي استرپتوكوكوس ترموفيلوس مي‌توان جهت ايجاد يك راهكار نوين درماني با تاثير بالا، عوارض جانبي پايين، بي‌خطر از نظر بيولوژيكي و هزينه كمتر استفاده كرد.

Background Probiotics are normal flora bacteria. So far, variousmechanisms have been identified for the effects of probiotics such as stimulating the immune system, modulating the composition of the normal flora of the digestive, urinaryand genital tract, and preventing the activity of fecal carcinogenicenzymes. Due to the high concentration ofnormal flora in the intestine and the nature of the most sporadicof colorectal cancers, this cancer is among the main candidates fortreatment with probiotics. In this study, the expression of NF-KB and MAPK genes were investigated HT29 colon cancer cells which co-cultered with Streptococcusthermophilus. Methods Supernatant and bacterial extract wereprepared from bacterial culture, and the cells were treated with these agents. Following, the effects ofcytotoxicity of the bacterial cell extract on the HT29 cell line during24hours were investigated using MTT method. Also, the expression ofNF-KB and MAPK genes in HT29 cell line was investigated using Real TimePCR Data were analyzed by one-way ANOVA. Results The results of MTT test showed that concentration of bacteria with OD= 0.05 had thehighest killing power in 4 hours. Streptococcus thermophilus increases the expression of MAPK genes and significantly reduces theexpression of NF-KB genes and causes apoptosis in cancer cells. Conclusion The results of this study showed that Streptococcusthermophiluscan be used to create a novel therapeutic treatment with highimpact, low side effects, bioavailability and cost reduction, or as asuitable side therapy.