تاثير تراكم كروماتين بر تماميت DNA اسپرم فريز و ذوب شده در مردان نورموزواسپرم

Effect of chromatin condensation on frozen-thawed sperm DNA integrity in normozoospermic men

زمينه و هدف: ذخيره ي انجماد سريع(Cryopreservation) اسپرم تكنيكي رايج براي افرادي كه در رابطه با مسئله ي ناباروري رنج مي­برند را برطرف نموده است. ولي اين روش مي تواند اثرات مخرب بر كيفيت دئوكسي ريبونوكلئيك اسيد،) (DNA و كروماتين كه معادل مرگ هسته و سلولي اسپرم دارد مي­باشد. ارزيابي ماركرهاي مختلف سلامت ماده ي ژنتيكي اسپرم عوامل موثر در جهت تشخيص قدرت باروري اسپرم، در درمان بيماران ناباروري است. در اين مطالعه، ارزش تشخيصي و بررسي احتمالي تاثير تراكم كروماتين بر تماميت DNA در ارزيابي اسپرم انجماد و ذوب شده در مردان نورموزواسپرم قرار گرفته است. روش بررسي: در اين مطالعه ي تجربي، 30 نمونه مايع مني مردان نورموزواسپرم به مدت دو هفته با تكنيك رايج در اكثر مراكز باروري ناباروري در دماي 196- درجه ي سانتي گراد انجماد سريع و سپس ذوب شدند. نمونه ها قبل و بعد از انجماد سريع از لحاظ تراكم غير طبيعي كروماتين، دناتوراسيون DNA و فراگمانتااسيون DNA به ترتيب با رنگ آميزي Toluidine blue (TB)، رنگ آميزي Acridine Orange (AO) و تستSperm Chromatin Dispersion (SCD) ارزيابي شدند. يافته ها: قبل از انجماد سريع تنها بين تراكم غير طبيعي كروماتين ارزيابي شده توسط TB و دناتوراسيون DNA بررسي شده توسطAO ارتباط وجود داشت (0.05> p). در حالي كه بعد از انجماد سريع بين تراكم غير طبيعي كروماتين، دناتوراسيون DNA و فرگمانتاسيون DNA همبستگي ديده شد (0.05> p). نتيجه گيري: تراكم غير طبيعي كروماتين مي تواند DNA را مستعد دناتوراسيون و فراگمانتاسيون كند.

Background and Aim: Sperm cryopreservation is a common technique used for management of male infertility. But this method has detrimental effects on sperm DNA and chromatin quality. Evaluation of different markers associated with the health of genetic material of sperm is beneficial for determination of the fertility of sperm. The aim of this study was to assess the effect of sperm chromatin condensation on frozen-thawed sperm DNA integrity in normozoospermic men. Material and Methods: In this experimental study, 30 semen samples from normozospermia men were cryopreserved for two weeks with a common technique used in most infertility centers, at -196 ° C and then thawed. Samples before and after freezing were evaluated for abnormal chromatin condensation, DNA denaturation and DNA fragmentation by toluidine blue (TB) staining, acridine orange (AO) staining and sperm chromatin dispersion (SCD) test respectively. Results: Before freezing, we found a significant correlation only between abnormal chromatin condensation (evaluated by TB) and DNA denaturation (assessed by AO) (p < 0.05). While after cryopreservation correlation was found between abnormal chromatin condensation and DNA denaturation and fragmentation (p < 0.05). Conclusion: Abnormal chromatin condensation can make DNA susceptible to denaturation and fragmentation.