عنوان مقاله :
بيان سلولاز CMC3 تحت كنترل راه‌اندازهاي متانل اكسيداز و الكل اكسيداز در مخمر Pichia pastoris
پديد آورندگان :
ممبني ، محسن دانشگاه تهران، پرديس كشاورزي و منابع طبيعي - گروه بيوتكنولوژي كشاورزي و منابع طبيعي , ارجمند ، ساره دانشگاه شهيد بهشتي، پرديس عمومي - مركز تحقيقات پروتئين , رعنايي‌سيادت ، اميد دانشگاه شهيد بهشتي، پرديس عمومي - مركز تحقيقات پروتئين , عباسي ، عليرضا دانشگاه تهران، پرديس كشاورزي و منابع طبيعي - گروه بيوتكنولوژي كشاورزي و منابع طبيعي , عليزاده ، هوشنگ دانشگاه تهران، پرديس كشاورزي و منابع طبيعي - گروه بيوتكنولوژي كشاورزي و منابع طبيعي
كليدواژه :
پروتئين نوتركيب , سلولاز , راه‌انداز , Pichia pastoris
چكيده فارسي :
راه اندازهاي كوتاه و قدرتمند از اجزاي كليدي بيان موفق پروتئين نوتركيب در ميزبان هاي مختلف از جمله مخمر Pichia pastorisمي باشند. در اين مطالعه بيان خارج سلولي آنزيم سلولاز بتااندوگلوكاناز (CMC3) تحت كنترل راه انداز متانول اكسيداز (MOX) و الكل اكسيداز 1 (AOX1) با تحت خوراك دهي متانول مورد بررسي قرار گرفت. به منظور حذف اثر تعداد كپي، كلون هاي نوتركيب حاوي يك نسخه جاي گيري در ژنوم با استفاده از روش RealTime PCR شناسايي و مورد استفاده قرار گرفتند. نتايج حاصل از سنجش فعاليت آنزيم، زايموگرافي و SDS-PAGE بيان قدرتمند و قابل مقايسه سلولاز تحت كنترل هر دو راه انداز MOX و AOX1 در اين مخمر را نشان دادند. نتايج بيان قوي CMC3 نشان داد كه راه انداز كوتاه MOX مي تواند با موفقيت براي توليد پروتئين نوتركيب با بيان بالا مورد استفاده قرار گيرد.
