ارزيابي اثر پپتيد كايمريك سكروپين-مليتين (CM11) بر روي تروفوزوئيت ژيارديا لامبليا در شرايط برون تني

Effect of Cecropin–melittin Chimeric Peptide (CM11) on Trophozoite of Giardia lamblia In Vitro

سابقه و هدف: پپتيدهاي ضدميكروبي، يكي از متنوع ترين تركيبات ضدميكروبي هستند كه به دليل پيدايش مقاومت عوامل بيماري زا به آنتي‌بيوتيك هاي رايج مورد توجه قرار گرفته اند. با اين وجود در مطالعات اندكي خواص ضد انگلي آن ها مورد بررسي قرار گرفته است. مطالعه پيش رو با هدف مقايسه اثرات پپتيد كايمريك مليتين-سكروپين (CM11) و مترونيدازول بر روي تروفوزوئيت ژيارديا لامبليا صورت گرفته است. مواد و روش‌ها: در اين تحقيق تجربي، با استفاده از آزمايش MTT، سميت سلولي پپتيد CM11 در غلظت‌هاي µg/ml 32-5/0 و مترونيدازول در غلظت‌هاي µg/ml20-25/0 بر روي سلول Caco-2 بررسي و IC50 محاسبه گرديد. جهت تعيين ميزان آپوپتوز القايي CM11 و مترونيدازول از روش فلوسايتومتري استفاده شد. سميت دارويي پپتيد بر روي تروفوزئيت ژيارديا لامبليا در شرايط مختلف برون‌تني مورد بررسي قرار گرفت. يافته‌ها: نتايج MTT نشان داد كه بالاترين درصد كشندگي بر روي سلول Caco-2، در گروه پپتيد CM11 در غلظت μg/ml32 پس ازگذشت 24، 48 و 72 ساعت به ترتيب 2/1±3/84، 9/0±7/88 و 5/1±87 درصد بود، در حالي كه در گروه مترونيدازول در غلظت μg/ml 20 پس از گذشت 24، 48 و 72 ساعت به ترتيب 3/2±35، 2/1±3/39 و 8/1±3/48 درصد بود. در بالاترين غلظت مورد استفاده طي 24 و 48 ساعت، بالاترين درصد كشندگي بر روي انگل در گروه پپتيد و مترونيدازول به ترتيب 2/0±8/99 و 6/0±99 درصد بود. ميزان كشندگي پپتيد و مترونيدازول بر روي انگل‌هاي متصل به سلول در بالاترين غلظت به ترتيب 1/0±7/99 و 3/0±5/99 درصد بود. استنتاج: نتايج اين تحقيق نشان داد كه پپتيد كايمريك سكروپين- مليتين (CM11) مي‌تواند كانديد مناسبي جهت درمان ژيارديازيس باشد.

Background and purpose: Antimicrobial peptides (AMP) are one of the most diverse antimicrobial compounds that have received much attention due to the development of drug resistance of pathogens to conventional antibiotics. But, few studies have evaluated anti-parasitic properties of AMP. The present study was conducted to compare the effect of a cecropin–melittin chimeric peptide (CM11) and metronidazole on Giardia lamblia trophozoite. Materials and methods: In this study, using MTT assay, the cytotoxicity of CM-11 peptide (0.5-32 μg/ml) and metronidazole (0.25-25 μg/ml) was investigated on Caco-2 cells and IC50 was calculated. Flow cytometry was used to determine the rate of induction of apoptosis by CM11 and metronidazole. The toxicity of peptide on G. lamblia trophozitis was evaluated in vitro under different conditions. Results: MTT results showed that the highest percentage of cytotoxicity in caco2 cells was seen at 32 μg/ml of CM11 peptide after 24 (84.3±1.2%), 48 (88.7±0.9%) and 72 (87±1.5%) hours. In metronidazole group, the highest cytotoxicity was observed in 20 μg/ml after 24 (35±2.3), 48 (39.3±1.2) and 72 (48.3±1.8%) hours. The highest concentrations of peptide (32 μg/ml) and metronidazole (20 μg/ml) showed 99.8±0.2% and 99±0.6% cytotoxicity effect, respectively. The cytotoxicity effect of peptide and metronidazole on G. lamblia attached to caco2 cells at highest concentrations were 99.7±0.1% and 99.5±0.3%, respectively. Conclusion: This study showed that cecropin-melittin chimeric peptide could be an appropriate candidate for the treatment of giardiasis.