پديد آورندگان :
كاظمي، نوشين دانشگاه تبريز - دانشكده كشاوزري - گروه علوم باغباني , زارع نهندي، فريبرز دانشگاه تبريز - دانشكده كشاوزري - گروه علوم باغباني , حبشي، علي اكبر پژوهشكده بيوتكنولوژي ايران (ابري)، كرج , دادپور، محمدرضا دانشگاه تبريز - دانشكده كشاوزري - گروه علوم باغباني
كليدواژه :
گرما درماني , Apple chlorotic leafspot virus , Apple stem grooving virus , Apple stem pitting virus , RT-PCR
چكيده فارسي :
اين پژوهش با هدف توليد نهال عاري از سه ويروس (ACLSV (Apple chlorotic leafspot virus)، ASGV (Apple stem grooving virus و ASPV (Apple stem pitting virus) در هفت رقم گلابي شامل ابته فتل، بيروتي، درگزي، كوشيا، لوئيزبون، ملينا و اسپادونا انجام شد. آزمايشها با ارزيابي اثربخشي دورههاي گرمادرماني شامل صفر، 7، 14 و 21 روز در دماي 38 درجه سانتيگراد و كشت مريستم انتهايي با اندازه كمتر از 0/2 ميليمتر، بر ميزان حذف ويروس از ريزنمونه ها انجام شد. در ابتدا حضور ويروسهاي مورد مطالعه در ريزنمونههاي مادري با روش RT-PCR مورد ارزيابي قرار گرفت و به جز، نمونه هاي مادري رقمهاي ابته فتل و بيروتي كه عاري از ويروس ASPV بودند، ساير ريزنمونهها به هر سه ويروس آلودگي داشتند. گرمادرماني و كشت مريستم در شرايط درون شيشهاي انجام شد. ريزشاخههاي حاصل از گرمادرماني و كشت مريستم توسط RT-PCR براي هر سه ويروس مورد بررسي قرار گرفتند و نتايج نشان داد ميزان حذف سه ويروس ACLSV، ASGV و ASPV بهترتيب با درصدهاي 63/26، 5/35 و 46/78 در رقمهاي مختلف با يكديگر متفاوت بود. بيشترين ميزان عاري شدن از ويروس در رقم كوشيا و كمترين آن در رقم اسپادونا مشاهده شد. افزايش طول مدت گرمادرماني رابطه مستقيم با افزايش درصد عاري سازي ريزنمونهها از هر سه ويروس مورد مطالعه داشت، اما از طرفي اين افزايش دوره زماني گرمادرماني در 21 روز باعث كاهش رشد و تكثير و حتي از بين رفتن ريزنمونه ها شد. بنابراين 14 روز گرمادرماني مؤثرترين تيمار جهت حذف آلودگي ويروسهايASGV ،ASPV و ACLSV بهترتيب با 61/4، 100 و 45/5 درصد از ريزنمونههاي مورد مطالعه بود. در پايان آزمايش نمونههايي كه توسط RT-PCR سالم تشخيص داده شدند، تكثير و ريشهدار شدند و در شرايط گلخانه اي سازگار شدند.
چكيده لاتين :
This study was aimed to eradicate three viruses, Apple chlorotic leaf spot virus (ACLSV), Apple stem grooving virus
(ASGV) and Apple stem pitting virus (ASPV) from seven pear cultivars including Abate Fetel, Beiruti, Dargazi,
Coscia, Louise Bonne, Mellina, Spadona. Experiments were performed by evaluation of the effectiveness of
thermotherapy duration including 0, 7, 14 and 21 days at 38 °C and meristem culturing in size of less than 0.2 mm on
virus eradication rates of explants. At first mother samples were tested for ACLSV, ASGV and ASPV by and RTPCR and all samples were infected by all three viruses, except Abate Fetel and Beiruti samples, that were free of ASP
virus. Thermotherapy and meristem culturing were performed in vitro. Explants from thermotherapy and meristem
culturing were tested by RT-PCR for all three viruses and the results showed that eradication rates of ACLSV, ASGV
and ASPV, respectively 78.46, 26.63 and 35.5 percent were different in the different pear cultivars. The highest rate
of virus eradication was related to Coscia and the lowest to Spadona cultivars. There was a direct relationship
between increasing the duration of thermotherapy and virus elimination of explants, but this increased period of time
up to 21 days reduced the growth and multiplication and even destroyed the explants. Therefore, 14 days of
thermotherapy was the most effective treatment for elimination of ASGV, ASPV and ACLSV, respectively 61.4, 100
and 45.5 percent, from pear explants. At the end of the experiment, samples that were diagnosed virus free using RTPCR, were proliferated, rooted and transferred to greenhouse condition for acclimation stage.