جداسازي و شناسايي باكتري هاي تجزيه كننده فنل از فاضلاب پالايشگاه نفت

Isolation and Identification of Phenol Degrading Bacteria from Oil Refinery Effluents

زمينه و هدف: فنل و مشتقات آن براي همه موجودات زنده سمي بوده و در فاضلاب پالايشگاه نفت يافت مي‌شوند. جداسازي و شناسايي باكتري‌ها از فاضلاب پالايشگاه نفت به منظور شناسايي باكتري‌هاي تجزيه كننده تركيبات آروماتيك مهم است. هدف از اين تحقيق جداسازي و شناسايي باكتري‌ها از سيستم تصفيه فاضلاب پالايشگاه نفت تهران و تعيين ميزان حذف فنل بوسيله باكتري‌ها در محيط كشت حاوي فنل بود. مواد و روش ها: مطالعه از نوع تجربي- آزمايشگاهي بود. نمونه برداري از سيستم لجن فعال تصفيه خانه فاضلاب پالايشگاه نفت تهران در دو مرحله انجام شد. ابتدا باكتري‌ها در محيط كشت حاوي فنل به مدت 3 هفته در انكوباتور دماي 30 درجه سانتي گراد به فنل خو داده شدند. سپس جداسازي و شناسايي باكتري‌ها مطابق روش استاندارد انجام شد . با كشت باكتري‌هاي ايزوله در محيط‌هاي كشت حداقل حاوي غلظت‌ هاي 0/5 تا 1/2 گرم بر ليتر فنل به عنوان تنها منبع كربن، رشد باكتري‌ها با اندازه گيري دانسيته اپتيك در طول موج 600 نانومتر بررسي شد. غلظت فنل به روش اسپكتروفوتومتري با استفاده از واكنشگر4-آمينوآنتي پيرين در طول موج 510 نانومتر مورد سنجش قرار گرفت. يافته ها: باكتري‌هاي جداشده از تصفيه خانه فاضلاب پالايشگاه نفت شامل سويه‌هاي سودوموناس، اسينتوباكتر، اشرشياكلي ، انتروكوكوس و انتروباكتر بودند. سويه سودوموناس قادر به حذف كامل فنل تا غلظت 0/9 گرم بر ليتر، سويه‌هاي اسينتو باكتر و اشرشياكلي تا غلظت 0/7 گرم- بر ليتر فنل را به طور كامل حذف و سويه‌هاي انتروكوكوس و انتروباكتر تا غلظت 0/5 گرم بر ليتر فنل را به ميزان صد در صد از محيط كشت حذف نمودند. بحث و نتيجه گيري: سودوموناس نسبت به ديگر باكتري‌هاي جدا شده از فاضلاب پالايشگاه نفت بيش‌ترين ميزان تجزيه فنل را در زمان كم‌تر نشان داده است.

Background and Objective: Phenol and its derivatives are toxic to all living organism and are found in oil refinery wastewater. Isolation and identification of bacteria from oil refinery wastewater is important to identify aromatic compounds degrading bacteria. The aims of this study were isolation and identification of bacteria from Tehran oil refinery wastewater treatment system and determine amount of phenol degradation by these bacteria. Method: This experimental study was conducted by using two series of activated sludge samples collected from Tehran oil refinery wastewater treatment plant. Adaptation of bacteria to phenol was done by culturing in growth medium containing phenol at 30°C in incubator. After that isolation and identification of bacteria was done according to standard method. Isolated bacteria were cultured in growth medium containing different concentration (0.5- 1.2gL-1) of Phenol. Bacteria growth was assayed by measuring optical density at 600nm. Concentration of Phenol in the medium growth solution was measured by spectrophotometric method using 4- Amino antipyrine as color reagent at 510 nm. Findings: Pseudomonas, Acintobacter, E.coli, Enterococcus and Enterobacter spps were isolated from oil wastewater treatment plant. Pseudomonas spp. completely removed 0.9gL-1 of Phenol, Acintobacter and E.coli removed 0.7 gL-1, Enterococcus and Enterobacter removed 0.5 gL-1 of Phenol from growth solution. Discussion and conculation: Pseudomonas spp. isolated from oil refinery wastewater treatment plant has highest phenol removal rate in shorter contact time than other isolated bacteria.