بررسي اثر بيمارگري سويه‌هاي Bacillus thuringiensis بومي خاك‌هاي زراعي ايران روي پروانه برگ خوار مصري پنبه Spodoptera littoralis

Pathogenic effects of Bacillus thuringiensis native Iranian soil strains on Egyptian cotton leafworm Spodoptera littoralis Z.

پروانه برگ ­خوار مصري پنبه (Boisduval) Spodoptera littoralis، آفتي همه چيزخوار با دامنه ميزباني وسيع است كه همه ساله خسارت قابل توجهي به محصولات كشاورزي وارد مي­كند. مشخص شده است كه همه سويه ­هاي Bacillus thuringiensis(Bt) روي اين آفت مؤثر نيستند و سويه­ هاي كمي با توجه به توكسين‌هاي پروتئيني خود روي آن مؤثرند. هدف از اجراي تحقيق حاضر، دستيابي به سويه هاي Btبومي با قابليت كنترل پروانه برگ­خوار مصري و بررسي تاثير محيط كشت تكثير باكتري بر قابليت حشره‌كشي سويه­ هاي منتخب بود. بدين منظور، قدرت بيمارگري 118 سويه بومي Bt(رشد داده شده در محيط R2NB) روي لاروهاي پنج روزه پروانه برگ­خوار مصري پنبه در دماي 27 درجه سلسيوس روي غذاي مصنوعي بررسي و غربال شدند. درصد مرگ و مير 118 سويه باكتري با غلظت 103 اسپور در ميلي‌ليتر نشان داد كه چهار سويه GON–9، QM–2، GN–13 و QM–1 به ترتيب با 93/33، 70، 46/67 و 43/33 درصد، بالاترين ميزان مرگ و مير و سويه هايGN–12 ،EN–2 ،GON–12 ،GON–7،CHI–2 ،AGI–7 ،AGI–3 وAGI–2 روي لاروهاي S. littoralis بي‌تأثير بودند. سپس سويه­ هاي مؤثر در دو محيط كشتNutrient Broth و R2NB تكثير شده، روي آفت مذكور ارزيابي شدند. نتايج نشان داد چهار سويه منتخب در محيط كشت R2NB نسبت به NB روي لاروهاي پروانه برگ­خوار مصري اثر كشندگي بيشتري داشتند و تفاوت آنها معني‌دار بود. همچنين محتويات ژن­هاي cry خصوصا ژن cry2Ab در سويه­هاي مؤثر مورد بررسي و رديابي قرار گرفت. نتايج واكنش زنجيره ­اي پليمراز نشان داد كه سويه‌هاي QM–1، QM–2 و GON–9 حاوي ژن cry2Ab هستند.

The Egyptian cotton leafworm is a polyphagous pest with a broad range of hosts causing annually significant damage to agricultural crops. It has been found that no all strain of Bacillus thuringiesis are effective on this pest and small numbers of the isolates are effective due to the contents of their crystalline proteins. The aim of the present study was to obtain native isolates of Bt that were capable of controlling and investigate the effect of growth medium of Bt on the insecticidal ability of selected isolates. Hence, the pathogenicity of 118 native isolates of B. thuringiesis cultivated in R2NB medium were determined on five–day–old larvae of Spodptera.littoralis at 27 °C on artificial diet. The mortality rate of 118 native isolates of Bt with a concentration of 103 spore ml–1 illustrated that the highest mortality rates belong to four isolates GON–9, QM–2, GN–13 and QM–1 with 93.33, 70, 46.67 and 43.43, respectively. In addition, GN–12, EN–2, GON–7, CHI–2, AGI–7, AGI–3 and AGI–2 isolates were ineffective on S. littoralis larvae. Then, the effective isolates grown in nutrient broth and R2NB medium were evaluated on mentioned pest. The results showed that the four selected isolates were more lethal on R2NB medium than NB on larvae of Egyptian cotton leafworm and their differences were significant. Also, the content of cry genes particularly cry 2Ab in effective isolates were examined and traced. The outcomes of polymerase chain reaction demonstrated QM–1, QM–2 and GON–9 have cry 2Ab.