اثر گليسيريزيك اسيد بر پراكسيداسيون ليپيديو فراسنجه هاي حياتي اسپرم گاو نژاد هلشتاين پس از فرايند انجماد- ذوب

Effect of glycyrrhizic acid on lipid peroxidation and vital parameters of Holstein bull sperm after freeze-thawing process

به‌منظور بررسي اثر گليسيريزيك اسيد بر ميزان پراكسيداسيون ليپيدي و فراسنجه هاي حياتي اسپرم گاو نژاد هلشتاين پس از فرايند انجماد- ذوب ، از چهار راس گاو بالغ نژاد هلشتاين، دو بار در هفته به‌كمك مهبل مصنوعي نمونه‌هاي اسپرم جمع‌آوري شد. براي از بين بردن اثرات فردي دام‌ها، انزال-ها به نسبت‌هاي مساوي با هم مخلوط شدند. نمونه‌هاي مني به‌صورت مساوي به چهار گروه (8 تكرار) تقسيم شدند. مقادير صفر (شاهد)، 20، 30 و 40 ميلي‌گرم بر ميلي‌ليتر گليسيريزيك اسيد به همراه رقيق كننده بر پايه سيترات- زرده تخم به نمونه‌هاي مني اضافه شد. نمونه‌هاي مني پس از طي مراحل سردسازي و تعادل، به‌مدت 30 روز در داخل تانك ازت نگهداري شدند. پس از فرايند ذوب، ميزان مالون‌دي‌آلدئيد در نمونه‌هاي اسپرم توسط روش الايزا سنجش شد. همچنين، يكپارچگي غشا، ميزان تحرك و درصد اسپرم‌هاي زنده مورد بررسي قرار گرفت. تحليل آماري توسط آزمون‌هاي واريانس يكطرفه و تعقيبي توكي انجام شد (0/05>p). با توجه به نتايج، يكپارچگي غشا، ميزان تحرك و درصد اسپرم‌هاي زنده در نمونه‌هاي اسپرم تحت تيمار با غلظت‌هاي 20، 30 و 40 ميلي‌گرم بر ميلي‌ليتر گليسيريزيك اسيد در مقايسه با گروه شاهد به‌صورت وابسته به دوز به‌طور معني‌داري افزايش و ميزان مالون‌دي‌آلدئيد به‌صورت وابسته به دوز به‌طور معني‌داري كاهش يافت (0/05>p). بنابراين، استفاده از گليسيريزيك اسيد در رقيق كننده مايع مني گاو موجب بهبود فراسنجه هاي حياتي اسپرم و كاهش پراكسيداسيون ليپيدي در اسپرم پس از فرايند انجماد- ذوب مي‌شود

To examine the effect of glycyrrhizic acid on lipid peroxidation and vital parameters of Holstein bull sperm after freeze-thawing process, semen samples were collected from four mature Holstein bulls twice a week using artificial vagina. Ejaculates were pooled in order to eliminate the individual effects of bull. Semen samples were divided into four equal groups (8 reps) including Zero (control), 20, 30 and 40 mg/ml of glycyrrhizic acid along with diluents based on egg yolk-citrate. Following cooling and equilibration stage, semen samples were stored in nitrogen tank for 30 days. After thawing procedure, level of malondialdehyde in sperm samples were measured by ELISA. Also, membrane integrity, motility and viability of sperm were examined. Statistical analysis was carried out using one-way ANOVA and post-hoc Tukey tests (p<0.05). According to the results, membrane integrity, motility and viability of sperm samples treated with concentration of 20, 30 and 40 mg/ml glycyrrhizic acid dose dependent manner significantly increased and level of malondialdehyde dose dependent manner significantly decreased ccompared to control groups (p<0.05). Therefore, use of glycyrrhizic acid in bull semen diluent can improve sperm vital parameters and decreases lipid peroxidation of sperm after freeze-thawing process.