بررسي آلودگي آرسنيك از منطقه معدن زيرزميني، سيرجان، و حذف آنها را با روش جذب بيولوژيكي

Identification of arsenic contamination from underground mine area, Sirjan, and removing them by biological absorption method

سابقه و هدف: فلزات سنگين از طريق فعاليت هاي صنعتي به محيط زيست وارد مي گردند. جهت حذف اين عناصر سمي روش بيولوژيك نسبت به بقيه روش ها از راندمان بالاتر و هزينه پايين تري برخوردار مي باشد. هدف از اين پژوهش جداسازي سويه هايي با مقاومت بالا نسبت به ارسنيك از 3 منطقه آب هاي زيرزميني سيرجان است. مواد و روش ها : نمونه ها بر روي محيط هاي LB آگار حاوي ppm 5 ارسنيك كشت داده شد. پس از 24 ساعت گرمخانه گذاري، 25 سويه مقاوم جدا شدند. DNA با روش فنل كلروفرم استخراج شد. در روش مولكولي PCR از پرايمرهاي قسمت SrDNA 16استفاده گرديد. مقاومت آنتي بيوتيكي سويه ي منتخب با روش آنتي بيوگرام و ميزان جذب زيستي آن با روش اسپكتروسكوپي جذب اتمي انجام شد. بهترين سويه با 16SrDNA PCR sequencing شناسايي شد.‬‬‬‬‬‬‬‬‬ نتايج: از 100% سويه هاي جداشده در اين پژوهش 20% شامل باسيل هاي گرم مثبت، 40% باسيل هاي گرم منفي، 28% كوكسي هاي گرم مثبت و 12% مارپيچي گرم منفي بودند. نتايج آناليز ژنتيكي براي نمونه ي باسيلي نشان داد كه سويه ي مربوطه 100% همساني با باسيلوس سرئوس سويه ي LS24 دارد. بحث: سويه ي برتر در اين مطالعه با حداقل غلظت مهاركنندگيppm 1000 در دماي 40 درجه سانتي گراد، اسيديته 7 و سرعت تكان 150، 8/62% ارسنيك را از محيط حذف كرد. نتايج حاصل از آزمون هاي بيوشيميايي و ژنتيكي سويه ي LS24 باسيلوس سرئوس را نشان داد. ‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬‬

Background and Objectives: Heavy metals causing the pollution of environment through industrial activities. biological methods have been used to remove toxic element that compared to other methods are promising technologies with higher efficiency and lower cost. The aim of this study was to isolate strains with high tolerance to arsenic from 3 area of groundwater Sirjan. Materials and methods: were cultured on LB agar medium containing 5ppm arsenic. After 24h incubation, 25 colonies of resistant strains were isolated. DNA was extracted by using phenol chloroform method and contaminated samples were examined by PCR reaction. In order to detect microorganisms by molecular methods , 16SrDNA primers were used. Amount of growth was determined by spectrophotometry at 600 nm in 24h. Antimicrobial resistance patterns and biosorption analysis was performed by method of antibiogram and atomic absorption spectroscopy. The strain was identified by 16SrDNA PCR sequencing. Results and Conclusion: From 100% of bacterial isolates in this study were 20% gram positive, 40% gram negative bacilli, 28% gram positive cocci and12% Gram negative spiral. Genetic analysis results for the basil sample showed that the strain was 100% consistent with the Bacillus Cereus strain LS24. The dominant strain had a minimum inhibitory concentration just 1000 ppm at a temperature of 40°C, pH 7 and 150 rpm. This bacterium was removed 62.8% of arsenic from the solution. Superior strain was Bacillus cereus LS24 by biochemical and genetic methods.