بافت شناسي و مكان يابي پمپ سديم - پتاسيم در روده ميگوي وانامي Litopenaeus vannamei

Histological and sodium - potassium pump immunolocalization in the intestine of the shrimp Litopenaeus vannamei

در پژوهش حاضر تعداد 20 قطعه ميگوي وانامي با ميانگين وزني 0/02±5/53 گرم در تانك هاي 500 ليتري با سه تكرار طي 8 هفته تغذيه شدند. در پايان، روده ميگوها در محلول بوئن فيكس شده و به روش بافت شناسي كلاسيك، رنگ آميزي باهماتوكسلين-ائوزين و گرين لايت و همچنين مكان يابي پمپ سديم - پتاسيم به روش ايمنوهيستوشيمي بررسي شدند. نتايج نشان داد: اپيتليوم روده مياني با سلول هاي استوانه اي ساده آستر شده و جايگاه هسته در اين سلول ها بصورت قاعده اي مي باشد و جايگاه پمپ سديم - پتاسيم در اين بخش بصورت قاعده اي مشاهده شد. بررسي بخش پيازي شكل روده انتهايي، لوب هاي بزرگ با فرورفتگي هاي عميق و فاصله كم بين لوب ها را نشان داد. فضاي خالي در بخش مياني ناحيه پيازي شكل در ناحيه راسي لوب ها مشهود بود و سلول هاي استوانه اي در بخش حاشيه اي اين فرورفتگي ها با هسته هاي قاعده اي مشاهده شدند. زائده تو خالي كوچكي در بخش ابتدايي و قسمت فوقاني ناحيه پيازي شكل قرار داشت كه به صورت لوله اي بوده و سلول هاي آن با هسته هاي قاعده اي آشكار بودند. ركتوم در بخش انتهايي روده بصورت لوله اي كوتاه و با اپيتليوم استوانه اي ساده با فرورفتگي هايي با عمق كم آستر شده بود و هسته در اين سلول ها به صورت مياني مشاهده شد. جايگاه پمپ سديم - پتاسيم در تمام روده انتهايي بصورت قاعده اي - جانبي مشاهده شد. نتايج نشان داد كه استفاده همزمان هماتوكسلين-ائوزين و گرين لايت روش مناسبي براي تفكيك بخش هاي مختلف روده در ميگوي وانامي بوده و همچنين مكانيابي آنزيم Na+,K+-ATPase مي تواند تائيد كننده نقش تنظيم يوني اين بخش روده مي باشد.

The present study has done on 20 pieces L. vannamei shrimp, with average weight 5.53±0.02 g, in 500-liter tanks with three replicates during 8 weeks. At the end, the shrimp intestine were fixed in Bouin's solution for classic histology by Hematoxylin-Eosin (H & E) and green light (GL) and for immunolocalization of the Na+,K+-ATPase enzyme (sodium - potassium pump) by Immunohistochemistry methods. The results showed that the midgut epithelium was covered by simple columnar cells and nucleus position was in basal region of cells and Na+,K+-ATPase enzyme observed in basal region of cells. Evaluation of rectal pad large lobes deep infoldings and distance between the lobes were observed. Lumen was observed in the middle of rectal pad and apical lobes were evident and columnar cells in the marginal infoldings with basal nucleus were observed. Small appendage that called posterior diverticulum was located in primary and in upper region of rectal pad. This region was tubular and it cells with basal nucleus were observed. Rectum was located in distal region of hindgut. This region was a short muscular tube and lined with a simple columnar epithelium with low infoldings and apical nucleus in these cells were observed. The Na+, K+-ATPase enzyme (sodium - potassium pump) was located in baso-latral area in all regions of hindgut cells. We concluded that the use of H&E and GL is an appropriate method to separate different parts of intestine in vannamei shrimp and also immunohistochemistry is a suitable method for Na+,K+-ATPase enzyme localization.