شناسايي و توالي‌يابي ژن‌هاي blaCTX-M در ايزوله هاي باليني كلبسيلا پنومونيه جدا شده از بيمارستان ميلاد

Identification and sequencing of bla CTX-M genes in clinical isolates of Klebsiella pneumoniae from Milad hospital

زمينه و هدف: كلبسيلا پنومونيه يكي از مهمترين علل ايجاد عفونت بيمارستاني است كه به ‌دليل ايجاد مقاومت آنتي‌بيوتيكي، اخيراً بسيار مورد توجه قرار گرفته است. هدف از مطالعه حاضر، شناسايي و توالييابي ژن‌هاي blaCTX-M در سويه‌هاي باليني كلبسيلا پنومونيه جدا شده از بيمارستان ميلاد تهران بود. روش تحقيق: در اين مطالعه توصيفي-مقطعي، ابتدا مقاومت آنتي‌بيوتيكي 100 جدايه باليني كلبسيلا پنومونيه نسبت به سفالوسپورين‌ها با استفاده از روش انتشار از آگار صورت گرفت؛ سپس ژن‌هاي مقاومت blaCTX-M group2 و blaCTX-M group9 با استفاده از روش PCR شناسايي شدند. در ادامه ژنوتايپينگ تعدادي از جدايه‌ها بر اساس توالي ژن‌هاي مذكور انجام گرفت و دندروگرام با استفاده از نرم‌افزار مگا (نسخه 6) رسم شد. يافته‌ها: بر اساس نتايج آزمايش حساسيت آنتي‌بيوتيكي، ميزان مقاومت به سفالوسپورين‌ها بين 30 تا 54 درصد بود. در مجموع، 5 درصد جدايه‌ها داراي ژن blaCTX-M- group2 و 8 درصد جدايه‌ها داراي ژن blaCTX-M-group9 بودند. همچنين نتايج ژنوتايپينگ نشان داد كه توالي blaCTX-M- group2 در اين مطالعه با توالي‌هاي ثبت‌شده در پايگاه داده جهاني (NCBI) شباهت اندكي داشت و توالي ژن blaCTX-M grop9 مشابه توالي blaCTX-M14 جدايه اشريشياكلي بود. نتيجه‌گيري: هر چند فراواني ژن‌هاي blaCTX-M در اين مطالعه پايين بود، اما با توجه به اينكه اين ژن‌ها از طريق عناصر ژني متحرّك در بين انتروباكترياسه‌ها قابل انتقال هستند زنگ خطر جدي در گسترش مقاومت دارويي در بين كلبسيلا پنومونيه محسوب مي‌شود.

Background and Aim: Klebsiella pneumoniae is one of the most important causes of nosocomial infection which has recently received much attention due to its antibiotic resistance. The aim of the present study is the identification and sequencing of blaCTX-M genes in clinical isolates of K. pneumonia isolated from Milad Hospital in Tehran. Materials and Methods: In this descriptive cross-sectional study, first, antibiotic resistance of 100 K. pnuemoniae isolates to cephalosporins was performed by agar diffusion method; then blaCTX-M group2 and blaCTX-M group9 resistance genes were identified by PCR. Genotyping was performed based on the sequence of these genes and the dendrogram was drawn using the Mega 6 software (version 6). Results: According to the antibiotic sensitivity testing, the amount of resistance to cephalosporins was between 30 and 54 percent. Overall, 5% of isolates had blaCTX-M group2 and 8% of isolates had blaCTX-M group9 as well as, the genotyping results showed that in this study bla CTX-M group2 sequence with the sequences in the global database (NCBI) had little similarity, and the blaCTX-M group9 gene sequence was similar to the bla CTX-M-14 sequence gene of E. coli. Conclusion: However, the frequency of blaCTX-M genes was low in this study, but due to the ability of these genes to spread by mobile genetic elements among enterobacteriaceae, it is considered alarm in the development of drug resistance among K. pneumoniae.