بررسي اثر كروسين بر بيان ژن اينترلوكين-6 در رده‌ي سلولي گليوبلاستوماي انساني

The Effect of Crosin on Expression of Interleukin 6 in Human Glioblastoma Cell Line

مقدمه: كروسين، ماده‌ي مؤثره‌ي زعفران از خانواده‌ي Iridaceae، گياهي علفي است كه در طب قديم ايران بر اثرات ضد التهابي و ضد توموري آن تأكيد شده است. گليوبلاستوما، از بدخيم‌ترين سرطان‌هاي مقاوم به پرتودرماني و شيمي‌درماني در بزرگسالان مي‌باشد. ارتباط بين سطوح بالاي اينترلوكين-6 و افزايش توان حمله و گسترش گليوبلاستوما در مطالعات مختلف ثابت شده است. هدف از انجام اين مطالعه، بررسي اثر ماده‌ي مؤثره‌ي زعفران، كروسين، بر بيان اينترلوكين-6 در رده‌ي سلولي گليوبلاستوماي انساني بود. روش‌ها: رده‌‌ي سلولي گليوبلاستوماي انساني، از بانك سلولي انستيتو پاستور ايران خريداري و با غلظت‌هاي مختلف كروسين به مدت 24 ساعت تيمار و تأثير آن بر ميزان بقاي سلولي با استفاده از آزمايش MTT ارزيابي شد و Half maximal inhibitory concentration (IC50) محاسبه گرديد. سلول‌هاي كشت شده، با غلظت‌هاي 5، 10 و 15 ميلي‌مولار كروسين تيمار شدند. RNA استخراج و (Complementary DNA (cDNA ساخته شد و براي سنجش ميزان بيان اينترلوكين-6 به روش Real-time polymerase chain reaction (Real-time PCR) مورد استفاده قرار گرفت. يافته‌ها: ميزان IC50 كروسين معادل 53/3 ميلي‌مولار به دست آمد و غلظت‌هاي 5، 10 و 15 ميلي‌مولار كروسين، به صورت معني‌دار و وابسته به دز، سبب كاهش بيان اينترلوكين-6 شد (0/050 > P). نتيجه‌گيري: نتايج حاصل از اين آزمايش، حاكي از اثر ضد التهابي و ضد توموري كروسين از طريق كاهش بيان اينترلوكين-6 در محيط التهابي سلول‌هاي توموري گليوبلاستوما مي‌باشد. از اين رو، كروسين مي‌تواند به عنوان ماده‌اي سودمند در مطالعه‌ي سرطان گليوبلاستوما مورد توجه قرار گيرد

Background: Crosin is one of the most important ingredients of saffron (the Iridaceae family) that has been emphasized in Iranian traditional medicine for its anti-inflammatory and anti-tumor effects. Glioblastoma is one of the most malignant cancers resistant to radiation and chemotherapy in adults. The goal of the present study was to investigate the effect crosin on expression of interleukin 6 (IL-6) in human glioblastoma cell line. Methods: Human glioblastoma cell line (1321N1) was purchased from Pasteur Institute of Iran. Cell was grown in Dulbico’s modified essential media (DMEM) supplemented whit 10% fetal bovine serum (FBS). The halfmaximal inhibitory concentration (IC50) value of crosin was obtained using MTT assay. Glioblastoma cell line was treated by different concentration of crosin (5, 10, 15 mM/ml) for 24 hours. Then, total RNA was isolated from cells and used for cDNA synthesis. Expression level of IL-6 was assessed using real-time polymerase chain reaction (real-time PCR). Findings: The IC50 value of crosin against 1321N1 cells after 24 hours were determined as 53.3 mMol/ml. Moreover, the expression of IL-6 gene was downregulated by increasing of crosin concentration compare to the control group (P < 0.050). Conclusion: It was observed that crosin inhibited production of IL-6 in glioblastoma cells. In conclusion, the result suggested crosin as a potential therapeutic candidate for neuroinflammation in glioblastoma cancer.