مرکز منطقه ای اطلاع رساني علوم و فناوري - بررسي اثر مايع آمنيوتيك انساني بر بقا و تكثير رده‌هاي سلولي ميلوماي انساني RPMI8226 و U266 در مقايسه با سرم جنين گاوي

چكيده فارسي :

بيماري مالتيپل ميلوما يك بدخيمي مربوط به پلاسماسل مي‌باشد. از آنجا كه مطالعه‌ي مكانيسم‌هاي بيماري‌زايي و مسيرهاي پيام رسان دخيل در سلول‌هاي عامل ايجاد بيماري در محيط آزمايشگاهي و نزديك به محيط فيزيولوژيك بدن مهم مي‌باشد؛ بنابراين بهترين محيط براي مطالعه‌ي سلول‌ها در محيط آزمايشگاهي، محيطي با بيشترين شباهت به محيط فيزيولوژيك بدن مي‌باشد. اين در حالي است كه استفاده از سرم جنين گاوي (FBS) به عنوان مكمل رشد سلول‌ها در فرآيند كشت سلولي بسيار رايج مي‌باشد؛ بنابراين هدف اين مطالعه تاثير مايع آمنيوتيك در تكثير (Ki-67 و Cyclin-D) و بقاء (Bax و Bcl2) دو رده ميلومايي RPMI8226 و U266 در مقايسه با سرم جنين گاوي مي‌باشد. روش كار: مايع آمنيوتيك انساني از 6 خانم باردار در حين عمل سزارين و بصورت استريل جمع‌آوري شد. پس از كشت رده‌هاي سلولي ميلوما (RPMI8226 و U266)، تيمار رده‌هاي سلولي در چهار گروه با نسبت‌هاي متفاوت مايع آمنيوتيك انجام شد. 48 و 96 ساعت پس از تيمار، شمارش سلولي و بررسي حيات سلول‌ها با استفاده تريپان بلو و لام نئوبار انجام گرفت. هم چنين تست MTT جهت بررسي زندهماني سلول‌هاي ميلومايي تيمار شده انجام گرفت و در نهايت ميزان بيان ژنهاي Ki67، Cyclin-D1، Bax و Bcl-2 توسط تكنيك Real time PCR و به روش SYBR Green مورد ارزيابي واقع شد. يافته‌ها: بررسي ميزان بيان ژنهاي دخيل در فرآيند تكثير و آپوپتوز سلولي نشان داد كه در گروه‌هاي مورد مطالعه تحت تيمار با مايع آمنيوتيك، افزايش معنادار بيان ژن هاي Ki-67، Cyclin-D1 و همچنين افزايش بيان ژن آنتي آپوپتوتيك bcl-2 و در مقابل كاهش معنادار بيان ژن مسئول آپوپتوز، Bax مشاهده شد. داده‌هاي ما نشان مي‌دهد مايع آمنيوتيك به عنوان يك منبع مغذي مي‌تواند رشد و تكثير سلول ها را تا 96 ساعت به صورت معناداري نسبت به سرم جنين گاوي افزايش دهد، هرچند كه ميزان تكثير و بقاي سلولي در 48 ساعت نسبت به 96 ساعت پس از كشت بيشتر مي‌باشد. نتيجه‌گيري: بنا بر يافته‌هاي اين مطالعه مي‌توان از مايع آمنيوتيك به عنوان حامي رشد به عنوان جايگزيني براي سرم جنين گاوي تا 96 ساعت استفاده نمود. در اين مطالعه تاثير اين مايع بر دو رده سلولي ميلومايي ارزيابي گرديد كه به نظر مي‌رسد بهتر است براي نتيجه‌گيري جامع‌تر در اين مورد بر سلول‌هاي ديگر نيز مورد آزمون واقع شود.