مطالعه اثرات سرطان‌زايي و سميت سلولي ديازينون در موش سوري در شرايط درون تني و برون تني

Carcinogenic and cytotoxic effects of Diazinon in the mouse: an in vivo and in vitro study

زمينه و هدف: در اين تحقيق اثرات سميت و سرطان­زايي ديازينون به عنوان يك آفت­كش ارگانوفسفره پرمصرف، بر موش سوري تحت شرايط درون‌­تني و اثر سميت سلولي آن به­‌صورت برون­‌تني مورد ارزيابي قرار گرفت. روش‌ها: موش ها به دو گروه 15تايي تيمار و شاهد تقسيم شدند. در گروه تيمار، ديازينون با غلظت ppm 1 به ميزان 1 ميلي ليتر به مدت 12 هفته روي پوست ريخته شد. در پايان دوره پس از كالبدگشايي، نمونه­‌هاي بافتي از ارگان­هاي مورد­نظر برداشت گرديد. سپس ديازينون با غلظت هاي 10، 25 ،50، 100 ميكروگرم بر ميلي‌­ليتر به كشت سلول­هاي هاي فيبروبلاست 929L موش اضافه شد. سميت سلولي با استفاده از تست MTT و ميكرونوكلئوس و كاريوتيپ به صورت برون­تني مورد سنجش قرار گرفته و درصد 50 IC تعيين گرديد. يافته‌ها: مشاهدات ميكروسكوپي بافت كليه مبين سميت سلولي خفيف در لوله­‌هاي پيچيده نزديك، سميت كبدي خفيف در بافت كبد وكارسينوما در بافت بيضه داشت. درصد فراواني ميكرونوكلئوس ها در غلظت µg/ml 100در مقايسه با گروه كنترل معني­دار بود. در تست MTTميانگين جذب نوري درغلظت­هاي10، 25 ،50، 100 ميكروگرم بر ميلي‌­ليتر به­‌طور معني­‌داري با ميانگين جذب نوري با گروه كنترل متفاوت بود (0/05 > p). نتيجه­‌گير: تماس پوستي ديازينون علاوه بر ايجاد آثار پاتولوژيك در ارگان­هاي مختلف موش سبب سميت سلولي و پيش‌­سرطان­زايي در آزمون­هاي سميت سلولي شد.

Background and aims: In this study, the toxicity and carcinogenicity of an organophosphate pesticide, diazinon, were studied in the mouse by MTT, micronucleus and karyotype methods. Morphological changes of cell lines in the vicinity of diazinon were also evaluated and recorded. Methods: Mice were randomly divided into two groups (n=15 per group): treatment and control groups. In the treatment group, diazinon (1 ml of 1 ppm concentration) was applied once daily topically on the shaved skin and for 12 weeks; in the controls, physiological salt solution was used. At the end of the period, tissue samples were taken from the organs after autopsy. Murine L929 fibroblast cells were cultured with and without diazinon (10, 25, 50, 100 µg/ml). The morphological changes of the cells were evaluated after 48 hours. The cytotoxicity was assessed in vitro by MTT assay and micronucleus and karyotype and IC50 percent were also determined. Results: Microscopic observations of kidney tissue revealed mild cytotoxicity in proximal tubules. Mild hepatotoxicity was also observed in the liver tissue. Morphological results of cell line showed that diazinon (50 μg/ml) had a significant effect compared to the control group. The percentage of micronucleus in the group treated with 100 µg/ml of diazinon was significantly higher than the control. In the MTT assay, the mean optical absorption at concentrations of 10, 25, 50, 100 μg/ml was significantly different from that of the control group (P <0.05). Conclusion: Skin contact with Diazinon induces pathologic effects on organs, cytotoxicity, and procarcinogenic effect in mice.