بررسي جهش‌هاي ژن ERG11 در سويه‌هاي كانديدا آلبيكنس مقاوم به فلوكونازول جدا‌شده از افراد مبتلا به ولوواژينيت در غرب مازندران

Investigation of Mutations of ERG11 Gene in Fluconazole Resistant Strains of Candida Albicans Isolated From Patients With Volvovaginitis in West of Mazandaran

زمينه و هدف: كانديدا آلبيكنس نوعي پاتوژن قارچي فرصت‌طلب در انسان است كه باعث ولوواژنيت كانديديايي مي‌شود. مقاومت به آزول مشكلي جهاني در درمان كانديديازيس است. مقاومت به آزول مي‌تواند از طريق مكانيسم ­هاي متفاوتي نظير جهش در ژن ERG11 رخ دهد. هدف از اين مطالعه، ارزيابي جهش­ هاي ژن ERG11 در جدايه‌هاي كانديدا آلبيكنس مقاوم به فلوكونازول به‌دست‌آمده از افراد مبتلا به ولوواژينيت در غرب مازندران بود. مواد و روش‌كار: در اين مطالعه نمونه­ هاي كلينيكي از مخاط واژينال 120 فرد جداسازي شد. جدايه ­هاي كانديدا آلبيكنس با استفاده از روش ­هاي استاندارد همچون لوله زايا و كشت در محيط كروم آگار شناسايي شدند. تست حساسيت به فلوكونازول در جدايه­ ها به روش­ هاي ديسك ديفيوژن و MIC ارزيابي شد. بعد از استخراج DNA، جهش ­هاي ژن ERG11 در جدايه­ هاي كلينيكي به روش PCR-توالي يابي تعيين شد. يافته‌ها: از 45 جدايه كانديدا آلبيكنس، 40 جدايه به فلوكونازول مقاوم بودند. MIC فلوكونازول در جدايه‌ها بين 2 تا 64 ميكروگرم بر ميلي‌ليتر تعيين شد. همچنين تحليل تعيين­ توالي نشان داد 7 جدايه مقاوم به فلوكونازول سه جهش بدمعني (D116E، K128T، A114S) در ژن ERG11 داشتند. نتيجه‌گيري: به نظر مي رسد فركانس بالاي مقاومت به فلوكونازول در اين مطالعه نتيجه عوامل مختلفي از جمله وقوع جهش در ژن ERG11 در جدايه­ هاي كانديدا آلبيكنس باشد.

Background and Aims: Candida albicans as an opportunistic fungal pathogen in human is the cause of volvovaginitis candidiasis. Azole resistance is cinsiderable as worldwide problem in treatment of candidiasis. Azole resistance can occur through different mechanisms such as mutation in ERG11 gene. The aim of our study was evaluation of ERG11 gene mutations in fluconazole resistant islotes of C. albicans obtained from patients with volvovaginitis in west of Mazandaran. Materials and Methods: In this study, clinical specimens were obtained from vaginal mucosa of 120 individual. C. albicans isolates were identified by standard methods such as germ tubes and culture in chrome agar media. Susceptibility test to fluconazole in the isolates was evaluated by Disc diffusion and MIC methods. After DNA extraction, ERG11 gene mutations in clinical isolates were determined by PCR- sequencing method. Results: From 45 isolates of C. albicans, 40 isolates were resistant to fluconazole. The MIC of fluconazole in isolates was determined between 2 to 64μg/ml. Also, sequencing analysis showed that 7 fluconazole resistant isolates had three missense mutations (D116E, K128T and A114S) in ERG11 gene. Conclusion: It apears that high frequency of floconazol resistance is the results of different reasons such as mutations in ERG11 gene in C. albicans isolates.