بررسي قابليت باكتري هاي Lactobacillus Delbrueckii و Bifidobacterium Animalis در جذب آفلاتوكسين M1 از شير

Assessment of Lactobacillus Delbruekii and Bifidobacterium Animalis Abilities to Absorb Aflatoxin M1 from Milk

زمينه و هدف:توكسين­زدايي ميكروبي يكي از روش­هاي حذف آفلاتوكسين­ها از جمله آفلاتوكسين M1 محسوب مي­شود. گزارش­ها نشان مي‌دهد برخي از سويه ­هاي خانواده اسيد لاكتيك از طريق جذب سطحي آفلاتوكسين­ ها به ديواره سلولي خود، مي‌توانند در حذف آنها و به عنوان يك نوع كشت آغازگر مؤثر باشند. در اين تحقيق، توانايي باكتري­هاي B. animalis و L. delbrueckii در ميزان جذب آفلاتوكسين M1 از شير بررسي شد. مواد و روش كار: بدين منظور، حدود 108 و 109سلول باكتري بر ميلي‌ليتر از باكتري ­هاي B. animalis زيرگونه لاكتيس و L. delbrueckii زيرگونه بلگاريكوس به شير بدون چربي فاقد آفلاتوكسين M1 تلقيح شد. سپس نمونه­ ها با غلظت‌هاي 25/0، 5/0 و 75/0 نانوگرم بر ميلي‌ليتر آفلاتوكسين M1 آلوده شدند. غلظت آفلاتوكسين باقي‌مانده در سوپرناتانت نمونه­ هاي شير در زمان‌هاي 5/0، 1، 2 و 24 ساعت و دماهاي 4 و 37 درجه سلسيوس توسط روش الايزاي رقابتي تعيين و نتايج توسط HPLC تأييد شد. يافته‌ها: نتايج نشان داد بيشترين ميزان حذف آفلاتوكسين M1 به ترتيب مربوط به B. animalis (2/5 ±60 درصد) با غلظت 108 سلول باكتري بر ميلي‌ليتر و L. delbrueckii (2/5 ±58 درصد) با غلظت 109 سلول باكتري بر ميلي‌ليتر و غلظت 5/0 نانوگرم بر ميلي‌ليتر سم در دماي 37 درجه سلسيوس به مدت 30 دقيقه بود. با مقايسه غلظت هر دو باكتري نيز چنين به نظر رسيد كه غلظت باكتري B. animalis در دماي 37 درجه سلسيوس و غلظت باكتري L. delbrueckii در دماي 4 درجه سلسيوس مؤثرتر عمل كرده‌اند. همچنين، نتايج حاكي از اين است كه قابليت باكتري­ ها در كاهش ميزان سم طي نيم ساعت در نمونه هاي شير با مقادير 75/0 نانوگرم در ميلي­ليتر سم در دماي 4 درجه سلسيوس و مقادير 5/0 نانوگرم در ميلي­ليتر سم در دماي 37 درجه سلسيوس بيشتر است؛ اما با گذشت زمان، شير آلوده به غلظت 75/0 نانوگرم در ميلي­ ليتر سم نسبت به 5/0 نانوگرم در ميلي­ ليتر، مقدار حذف آفلاتوكسين بيشتري را نشان داد. نتيجه‌گيري: B. animalis و L. delbrueckii مي‌توانند به عنوان دو پروبيوتيك سودمند در كاهش اثرات مخرب آفلاتوكسين M1 عمل كنند.

Background and Aims: Microbial detoxification is one of the methods for eliminating of aflatoxins, including aflatoxin M1. Reports indicate that some strains of lactic acid bacteria family through surface adsorption of aflatoxin in their cellwall can be effective in removing them and as a primer culture. In this study, the ability of Bifidobacterium animalis and Lactobacillus delbrueckii in the adsorption of aflatoxin M1 in skim milk was assessed. Materials and Methods: For this purpose, about 108 and 109 cfu/ ml of B. animalis (Lactis) and L. delbrueckii (Blegaricus) were inoculated into skim milk without aflatoxin M1. Then, the samples were spiked by aflatoxin M1 in concentrations of 0.25, 0.5 and 0.75 ng/ ml. The concentration of the aflatoxin reside in supernatant of milk samples after different storage times (0.5, 1, 2 and 24 h) and temperatures of 4 and 37°C was measured by ELISA method, and the results were confirmed by HPLC. Results: The results showed that the highest amount of aflatoxin M1 removal was respectively related to B. animalis (60 ± 2.5%) with a concentration of 108 cells/ ml and L. delbrueckii (58.5 ± 2.5%) with a concentration of 109 cells/ ml and a concentration of 0.5 ng/ml poison at 37°C for 30 minutes. By comparing the concentration of both bacteria, it also appeared that the B. animalis concentration at 37°C and L. delbrueckii concentration at 4°C were more effective. Also, the results indicate that the ability of bacteria to reduce the amount of poison in half an hour in milk samples with values of 0.75 ng/ml poison at 4°C and 0.5 ng/ml poison at 37°C is higher; but over time, contaminated milk at a concentration of 0.75 ng/ml poison compared to 0.5 ng/ml poison showed an increased amount of aflatoxin removal. Calclusion: B. animalis and L. delbrueckii can act as two useful probiotics to reduce the harmful effects of aflatoxin M1.