جداسازي فاژ ليتيك اختصاصي اشريشياكلي از فاضلاب و بررسي اثر ضدميكروبي آن در گوشت مرغ

Isolation of Escherichia coli specific Lytic Phages from Waste Water and evaluation of its antimicrobial effect In Vitro and Chicken meat

زمينه و اهدف: امروزه با توجه به مضرات استفاده از نگه­دارنده­هاي شيميايي مواد غذايي، استفاده از نگه­دارنده­هاي طبيعي افزايش يافته است. باكتريوفاژها (فاژها) انگل­هاي اجباري باكتريايي هستند كه براي انسان و حيوان بي­خطر مي­باشند، لذا مي­توانند به­عنوان عوامل ضدميكروبي طبيعي مناسب در مواد غذايي به­كار روند. هدف اين تحقيق، جداسازي فاژ ليتيك اشريشياكلي از فاضلاب، شناسايي و ارزيابي كارايي آن در كنترل اشريشياكلي درگوشت مرغ بود. مواد و روش كار: باكتري اشريشياكلي كاستلاني (1330: PTCC) از سازمان پژوهش­هاي علمي و صنعتي ايران تهيه شد. فاژ مورد نظر از فاضلاب كارخانه لبني ملاير جداسازي و اثر ضدميكروبي آن­ از طريق ايجاد پلاك بررسي شد. مورفولوژي و تشخيص خانواده احتمالي آن با ميكروسكوپ الكتروني گذاره (TEM) مشاهده و بررسي شد. طيف ميزباني عليه 5 سويه اشريشياكلي و اثر آن عليه باكتري­هاي سالمونلا انتريكا، استافيلوكوكوس اورئوس و يرسسينيا انتركوليتيكا نيز ارزيابي شد. تأثير فاژ ليتيك اختصاصي اشريشياكلي بر ميزان آلودگي اشريشياكلي تلقيح شده در گوشت مرغ نيز بررسي شد. يافته‌ها: فاژ جداسازي شده فاقد ­دم، داراي كپسيد كروي، و به احتمال زياد متعلق به خانواده­ تكتي­ويريده بود. فاژ مورد نظر برخلاف ساير جنس­هاي مورد آزمون، بر 5 سويه اشريشياكلي انتخابي اثر ضدميكروبي داشت. نتايج تأثير فاژ بر ميزان آلودگي اشريشياكلي در گوشت مرغ نشان داد كه ميزان باكتري از 10log 3 پس از 24 ساعت به 10log 8/1 رسيد و پس از 4 روز به كمتر از 1 سيكل لگاريتمي رسيد. نتيجه‌گيري: فاژ جداسازي شده اثر ضدميكروبي قوي بر اشريشياكلي داشت؛ بنابراين مي­تواند كانديداي مناسبي به­عنوان نگهدارنده جهت كاربرد در مواد غذايي باشد.

Background and Aims: Nowadays due to the harmfulness of chemical preservatives, the use of natural preservatives has increased. Bacteriophages are bacterial mandatory parasites that are harmless for human and animals and can, therefore, be used as appropriate antimicrobial agents in food. The aim of this study was to isolate the Escherichia coli lytic phage from wastewater, identify and evaluate its efficiency in controlling E. coli infection in chicken meat. Materials and Methods: E. coli (PTCC: 1330) was obtained from Iranian Science and Technology Research organization. Phage isolated from the wastewater of Malayer dairy factory and its antimicrobial effect was investigated through plaque formation. TEM microscopy was used to observe the phage morphology and to determine its possible family. Host spectrum against 6 E. coli strains and its effect? against Salmonella enterica, Staphylococcus aureus and Yersinia enterocolitica were also evaluated .The effect of E. coli lytic phage on the amount of inoculated E. coli to contaminate the chicken meat was examined. Results: The isolated phage was tailless and had round capsid, possibly belonging to the Tectiviridae family. The target phage had antimicrobial activity against 5 selected E. coli strains, unlike the other genera tested. The effect of the phage on the E. coli contamination in chicken meat showed that the bacterial count was reduced from 3 log10 to 1.8 log10 after 24 h and reached less than 1 log cycle after 4 days. Conclusion: The isolated phage had strong antimicrobial effect against E. coli. Therefore, it can be a good preservative candidate for use in foods.