بكارگيري تكنيك نوين تركيب PCR كمي با پروپيديوم مونوآزيد جهت شمارش استافيلوكوكوس اورئوس انتروتوكسيژنيك در محصولات خامه‌اي قنادي

زمينۀ مطالعه: استافيلوكوكوس اورئوس يكي از پاتوژن هاي مهم انساني است كه عامل بروز عفونت بوده و نيز با توليد انواع مختلف انتروتوكسين ها موجب مسموميت هاي غذايي مي گردد. استفاده از روش هاي معمول كشت جهت شمارش استافيلوكوكوس اورئوس داراي محدوديت هايي مانند مدت زمان طولاني براي رشد باكتري و فقدان حساسيت و دقت لازم در مورد سلول هاي زنده غير قابل كشت مي باشد. هدف: هدف از انجام اين پژوهش جستجو و شمارش استافيلوكوكوس اورئوس توليد كننده انتروتوكسين هاي AE در محصولات خامه اي قنادي با استفاده از روش  PCR زمان واقعي در تركيب با پروپيديوم مونوآزيد (PMA) جهت تفكيك سلول هاي زنده از مرده بود. روش‌كار: تعداد 100 نمونه شيريني خامه اي به مدت 2 ماه و به صورت تصادفي از كارگاه هاي قنادي شهر آمل تهيه شد. پس از تهيه رقت از نمونه، پلت هاي باكتريايي جداسازي و قبل از استخراجDNA ، با PMA تيمار شدند. PCR زمان واقعي جهت شمارش كل سلول هاي استافيلوكوكوس اورئوس و نيز سويه هاي انتروتوكسيژنيك آن با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي انجام شد. نتايج: نتايج شمارش كشت معمولي به نتايج PMA-qPCR بسيار نزديك بود (P 0/05)، ليكن داده هاي به دست آمده از qPCR كه مجموع سلول هاي مرده و زنده را شمارش مي نمايد از نتايج دو روش ديگر تعداد بيشتري باكتري را نشان داد. حساسيت روش به كار رفته در اين مطالعه جهت جستجوي تعداد اندك استافيلوكوكوس اورئوس (كمتر از 10سلول در گرم) قابل ملاحظه به نظر مي رسد. نتيجه‌گيري نهايي: يافته ها نشان داد كه استفاده از PCR در تركيب با  PMAنتايج قابل اعتماد تري نسبت به روش معمولي كشت حاصل مي نمايد. با توجه به مدت زمان كوتاه حصول نتايج، اختصاصي بودن و حساسيت قابل ملاحظه اين روش اميد است در آينده نزديك در آزمايشگاه هاي كنترل كيفيت مواد غذايي دستگاه هاي نظارتي به كار گرفته شود.