تعيين فلورغالب قارچي و باكتريايي ريزوسفر و شناسايي ريز ساز واره‌هاي مولد آنزيم فسفوليپاز و كيتيناز در خاك‌هاي حاصلخيز ايرانشهر

Scrutiny Flora and identify the dominant fungal and bacterial rhizosphere microorganisms in the soil fertile productive chitinase and phospholipase enzymes in Iranshahr

اين پژوهش با هدف شناسايي و جدا سازي باكتري ها و قارچ هاي مولد آنزيم هاي فسفو ليپاز و كيتيناز در خاك منطق حاصلخيز ايرانشهر جهت شناسايي و توليد كود بيولوژيك براي استفاده ي كشاورزان استان با استفاده از ريزسازواره هاي سازگار با شرايط جغرافيايي منطقه (هدف ثانويه) انجام پذيرفت.نمونه گيري از خاك مزارع كشاورزي مناطق حاصلخيز شهر ايرانشهر بوده و خاك مناطق نمونه برداري به ميزان 5+10 رقيق سازي شدند.در ادامه جهت خالص سازي به محيط هاي عموميPda و Nutrient agarمنتقل گرديدند.براي سوبستراي كيتين، كيتين ميگو از كمپاني سيگما آلدريچ آمريكا و براي سوبستراي فسفوليپاز از زرده ي استريل تخم مرغ استفاده شد.پس از ادغام سوبسترا هاي اختصاصي با محيط هاي عمومي، ريز ساز واره هاي آنزيم مثبت از طريق توليد هاله شناسايي و جدا سازي شدند كه در بين قارچ ها، قارچ موكور و در بين باكتري ها سودوموناس در صدر قرار داشتند.آنزيم ها با تست اسپكتوفتومتري و سنجش ميزان جذب نوري در طول موج هاي 410 و 280 نانو متر شناسايي و تاييد شدند.در اين تست محيط ها به صورت مايع تهيه و به عنوان بلانك استفاده شد و محيط هاي حاوي آنزيم جهت خالص سازي از فيلتر هاي ميكروبي عبور داده شدند. نمونه ها جهت شناسايي مولكولي به شركت ميكروژن كره جنوبي ارسال گرديدند كه پاسخ تست هاي شناسايي مولكولي نيز تاييد كننده ي تست هاي بيو شيميايي و مورفولوژيك بود.باكتري و قارچ غالب توليد كننده ي آنزيم فسفوليپاز به ترتيبBacillussubtilis و Mucorhiemalisبودند، همچنين بيش ترين ميزان توليد آنزيم كيتيناز نيز در ريزسازواره هايPseudomonasputidaو Mucorhiemalisمشاهده شد. تغييراتpHنشان داد افزايشpHبه سمت قليايي باعث كاهش شديد ترشح آنزيم ميشود. بيش ترين ميزان توليد هر دو آنزيم در قارچMucorhiemalisديده شد.

The aim of this study was to identify and isolate bacteria and fungi that produce phospholipase and chitinase enzymes in Iranshahr fertile logic soil to identify and produce biological fertilizers for farmers in the province using microorganisms compatible with the geographical conditions of the region (secondary target). Sampling of soil from agricultural fields in fertile areas of Iranshahr city and soil sampling areas were diluted by 10+ 5. For Chitin, Shrimp substation, Sigma Aldrich USA and sterile egg yolk were used for phospholipase substrate. After merging the dedicated substrates bygeneral media culture, positive enzyme microstructures were identified and isolated by halo production. Enzymes were identified and confirmed by spectrophotometry testing and measurement of light absorption at 410 and 280 nm wavelengths. Samples were sent to South Korea's Macrogen Company for molecular identification. The predominant bacteria and fungi producing phospholipase were Bacillus subtilis and Mucor hiemalis, respectivelythe highest production of chitinase enzyme was observed in Pseudomonas putida and Mucor hiemalis microsatellites. Changes in pH showed that an increase in pH to alkalinity greatly reduced enzyme secretion. The highest levels of both enzymes were found in Mucor hiemalis