اثرات محيط كشت شرايطي شده حاصل از سلول‌هاي سرتولي بيضه و رتينوئيك اسيد بر تعداد كلوني‫هاي حاصل از سلول‌هاي مزانشيمي مغز استخوان

زمينه و هدف: با توجه به اهميت سلولهاي بنيادي به ويژه سلولهاي بنيادي مزانشيمي مغز استخوان در توليد رده هاي مختلف سلولي امروزه تلاش بر اين است كه از پيوند اين سلولها در طي سلول درماني جهت درمان بيماريهاي مختلف استفاده شود. تكثير سلولي و حيات سلول هاي بنيادي پس از پيوند اهميت بسزايي دارد. از آنجايي كه ناباروري در مردان و زنان از مشكلات عمده سلامت اجتماع محسوب ميشود، تلاش بر اين است كه از تمايز سلول هاي بنيادي، رده هاي مختلف سلولي مخصوصاً سلولهاي جنسي توليد شود. با پيشرفت تحقيقات در آينده اميد آن ميرود اين سلولها جهت درمان بيماريهاي مختلف مخصوصاً درمان مرداني كه بافت بيضه آنها فاقد سلولهاي نطفه اي است استفاده شوند. اما در استفاده از سلولهاي بنيادي جهت سلول درماني توجه به اين نكات لازم است كه اولاً محيط كشت هايي طراحي شود كه تعداد اين سلولها را افزايش داده و كارايي پيوند را بالا ببرد و ثانياً سلامت اين سلولها از لحاظ آسيبهاي DNA را تضمين نمايد. روش كار: در اين مطالعه سلولهاي بنيادي مزانشيمي از بافت مغز استخوان موش جداسازي شده و سپس در معرض محيط شرايطي شده حاصل از سلول هاي سرتولي و غلظت 610 مولار رتينوئيك اسيد قرار گرفتند. از آنجاييكه سلولهاي بنيادي مزانشيمي به شكل كلوني هاي فيبروبلاستيك ظاهر مي شوند لذا هر سه روز يكبار پس از كشت (روزهاي 2,5, 8, 11 و 15) با استفاده از ميكروسكوپ اينورت تعداد كلوني ها شمارش شدند. رنگ آميزي اتيديم برومايد اكريدين ارنج نيز جهت تعيين تعداد هسته هاي آپويتيك در سلولهاي حاصل از كشت به ترتيب در روزهاي 10 و 15 كشت انجام شد تا محيط كشت مناسبي كه تعداد كلوني هاي بيشتري توليد كرده و آسيب سلولي كمتري به همراه داشته باشد انتخاب شود. يافته ها: نتايج نشان داد اثرات رتينوئيك اسيد روي رشد و بقاي سلولهاي بنيادي مغز استخوان وابسته به زمان است، به نظر ميرسد كه در زمان كم باعث افزايش تكثير سلول ها شده در نتيجه تعدادكلوني ها افزايش مي يابد در حالي كه با افزايش زمان همين غلظت اندك 1ميكرو مولار رتينوئيك اسيد باعث آپوپتوز سلول ها مي گردد. همچنين محيط شرايطي شده حاصل از سلولهاي سرتولي باعث افزايش تكثير سلولهاي بنيادي مغز استخوان مي شود. نتيجه گيري: به نظر مي رسد كه در تمايز سلولهاي مزانشيمي به سمت سلولهاي زايا استفاده از محيط شرايطي شده در كنار رتينوئيك اسيد به دليل خاصيت تكثيري آن بهتر از رتينوئيك اسيد به تنهايي باشد