بهينهسازي فاكتورهاي مؤثر در رشد باكتري Escherichia coli توليدكننده پروتئين نوتركيب βNGF با استفاده از روش سطح پاسخ

توليد پروتئينهاي نوتركيب در ميزبان باكتريايي اي كلاي در چند دهه اخير بسيار رواج پيداكرده است. مطالعات و آزمايشهاي بسيار زيادي در زمينه بهينه سازي و افزايش توليد و بيان پروتئينهاي نوتركيب در اين ميزبان انجام گرفته است. از راههاي افزايش توليد، رسيدن به تراكم بالاي سلولي (افزايش غلظت سلولي) و به طبع آن توليد بيشتر پروتئينهاي داخل سلولي ازجمله پروتئين نوتركيب ndash;NGF beta;ميباشد. بدين منظور در اين پژوهش براي اولين بار با استفاده از گليسرول و عصاره مخمر به عنوان منابع كربن و نيتروژن و همچنين نمك MgCl2 به عنوان افزايش دهنده رشد، كشت باكتري در تراكم سلولي بالا انجام شد. همچنين تأثير شرايط كشت شبانه بر رشد باكتري مورد بررسي قرار گرفت. بهينه شرايط با استفاده از روش سطح پاسخ به دست آمد كه شامل غلظت 18/23 گرم بر ليتر گليسرول، غلظت 14/44 گرم بر ليتر عصاره مخمر و غلظت mM 10 نمك MgCl2 ميباشد. همچنين كشت 14 ساعته در دماي 37 درجه سانتي گراد و دور شيكرrpm 180 به عنوان شرايط بهينه رشد معرفي شد. ايﻦ ﻣﻄﺎﻟﻌﻪ ﻧﺸﺎن داد ﮐﻪ ميزان رشد سلولي و ﺗﻮﻟﯿﺪ پروتئين نوتركيب ndash;NGF beta; در ﺷﺮايﻂ بهينه شده ﻧﺴﺒﺖ ﺑﻪ ﻣﺤﯿﻂ ﮐﺸﺖ ﭘﺎيﻪ اﻓﺰايﺶ قابل توجهي داﺷﺘﻪ اﺳﺖ.