اثر اوره، گوانيدين هيدروكلرايد و حلال‌هاي آلي بر فعاليت سينتيكي آنزيم پروتئيناز-K

اهداف: پروتئيناز K يك اندوپپتيداز خارج سلولي است كه توسط قارچ تريتيراچيوم آلبوم ليمبر (Tritirachum album Limber) ترشح مي‌شود و متعلق به رده سرين‌اندوپپتيدازها است. اين آنزيم در مطالعات مربوط به پروتئين‌ها كاربرد دارد. هدف مطالعه حاضر بررسي اثر اوره، گوانيدين‌هيدروكلرايد و سه حلال آلي متانول، اتانول و ايزوپروپانول بر فعاليت سينتيكي آنزيم پروتئيناز K بود. مواد و روش‌ها: در مطالعه تجربي حاضر مطالعات سينتيكي با دستگاه اسپكتروفتومتر UVVis، در دماي °C۴۰، pH برابر ۷/۴ و غلظت‌هاي مختلف سوبسترا، اوره و گوانيدين‌هيدروكلرايد انجام شد. يافته‌ها: اوره در غلظت‌هاي يك و ۲‌مولار موجب كاهش Vmax و Km آنزيم شد، ولي در غلظت‌هاي بالاتر مانند ۳ و ۴مولار فعاليت آنزيم را افزايش داد. گوانيدين‌هيدروكلرايد بر فعاليت آنزيم اثر مهاركنندگي داشت، به‌طوري كه در غلظت‌هاي يك، ۲ و ۳‌مولار موجب كاهش در Vmax و Kmشد و به‌عنوان مهاركننده نارقابتي براي آنزيم عمل كرد. حلال‌هاي آلي متانول، اتانول و ايزوپروپانول در غلظت‌هاي پايين اثر فعال‌كنندگي و در غلظت‌هاي بالا اثر مهاري بر فعاليت سينتيكي آنزيم پروتئيناز K داشتند. نتيجه‌گيري: اوره در غلظت‌هاي پايين اثر مهاري و از غلظت ۲مولار به بالا اثر فعال‌كنندگي بر فعاليت آنزيم دارد، ولي گوانيدين‌هيدروكلرايد در تمامي غلظت‌ها اثر مهاري نشان مي‌دهد و مي‌توان از آن به‌عنوان يك مهاركننده آنزيم نام برد. اثر حلال‌هاي آلي متانول، اتانول و ايزوپروپانول روي فعاليت آنزيم پروتئيناز K به درصد حجمي حجمي آنها بستگي دارد؛ آنها در درصد‌هاي پايين باعث فعال‌شدن آنزيم مي‌شوند، ولي در درصدهاي بالا اثر مهاري دارند، به‌طوري كه متانول زير ۳۰%، اتانول و ايزوپروپانول كمتر از ۵۰% آنزيم را فعال مي‌كنند.