مهار پليمريزاسيون ماده هِم (Heme)، مكانيسم اثر ضد مالاريايي اختصاصي P‌hlomis caucasica Rech.f.

Inhibition of Heme Polymerization, the Mechanism of Antimalarial Activity in Phlomis caucasica Rech.f. (Lamiaceae)

مقدمه: مالاريا يكي از مهم‌ترين بيماري‌هاي انگلي در انسان است كه روزانه منجر به مرگ 1200 نفر مي‌شود. اين بيماري توسط پلاسموديوم ايجاد مي‌شود. انگل پلاسموديوم، هموگلوبين موجود در گلبول قرمز را به هِم (Heme) آزاد و اسيدهاي آمينه، هيدروليز مي‌كند. اين انگل براي سميت‌زدايي هِم آزاد توليد شده، مجهز به سيستم اختصاصي دفع سميت هِم مي‌باشد كه مهم‌ترين مكانيسم، پليمريزه شدن هِم مي‌باشد. لذا پي بردن به تركيبات مهاركننده‌ي پليمريزاسيون هِم، داراي اهميت بسزايي در كشف تركيبات ضد مالاريا مي‌باشد. هدف: بررسي مكانيسم مهار پليمريزاسيون هِم برخي از گياهان خانواده نعناييان با پتانسيل اثر ضدمالاريايي هدف كلي اين تحقيق مي‌باشد. روش بررسي: در اين مطالعه، هفت گياه از خانواده نعناييان با متانول بوسيله روش ماسراسيون عصاره‌گيري شدند. براي بررسي فعاليت مهار پليمريزاسيون هِم عصاره‌هاي گياهي از روش ITHD (Inhibition Test of Heme Detoxification) استفاده شد. هِمين كلرايد: تويين 20 و نمونه‌ها با نسبت 9:9:2 در پليت 96 چاهكي مخلوط و به مدت 24 ساعت در دماي ºC60 انكوبه شدند. جذب محلول‌ها با دستگاه الايزاريدر در طول موج nm405 بررسي و درصد مهار پليمريزاسيون هِم آنها محاسبه شد. از كلروكين دي فسفات به عنوان كنترل مثبت استفاده شد. گياهان مؤثر با روش ماسراسيون توسط حلال‌هاي اتردوپترول، كلروفرم، متانول، متانول 70: آب 30 (هيدروالكلي 70%) و آب فركشنه و اثر مهار هم‌زدايي آنها نيز مورد بررسي قرار گرفت. نتايج: عصاره متانولي Marrubium astracanicum Jacq. وPhlomis caucasica Rech.f. قادر به مهار پليمريزاسيون هِم به ترتيب 40 و 35% مي‌باشند. بررسي فركشن‌ها نشان داد فركشن آبي P. caucasica به طور كامل (100%) پليمريزاسيون هِم را مهار مي‌كند. نتيجه‌گيري: فركشن آبي گياه گوش بره قفقازي (P. caucasica) با مكانيسم اختصاصي مهار هم‌زدايي، براي رسيدن به تركيبات مهاركننده‌ي پليمريزاسيون ماده هم در روند كشف داروي ضدمالاريا معرفي مي‌شود.

Background: Malaria is one of the most important parasitic diseases in the world caused by Plasmodium species. The malaria parasite digests hemoglobin in vacuole to amino acids and heme. Plasmodium has got several detoxification mechanisms to protect itself from toxic heme. The most important mechanism is heme polymerization. Identifying compounds that inhibit heme polymerization is an approach for detecting antimalarial drugs. Objective: This work has intended to screen some plants from Lamiaceae family for mechanism of antimalarial by ITHD (Inhibition Test of Heme Detoxification). Method: Inhibition of heme polymerization of total methanol extracts from seven plants of Lamiaceae family have been evaluated by the ITHD method. Hemin Chloride, tween 20 and samples were added in each well of a 96-well plate with ratio 9:9:2, and incubated at 60ºC for 24 h. The plate was read with a micro-ELISA reader at 405 nm, and percentage of heme polymerization inhibition was calculated. The fractions including petroleum ether, chloroform, methanol, methanol: water (7:3) and water were obtained by maceration and the inhibition of heme polymerization evaluation were assessed using the ITHD. Results: Total methanol extracts of Marrubium astracanicum Jacq. and Phlomis caucasica Rech.f. demonstrated inhibition of heme polymerization, 40 and 35% respectively. The aqueous fraction of P. caucasica inhibited heme polymerization 100%. Conclusion: P. caucasica could be a selective candidate for drug discovery program in malaria