روش شناسايي و تعيين درصد لنفوسيت‌هاي TH17 در خون محيطي به روش فلوسايتومتري

مقدمه: براي جدا كردن لنفوسيت‌هاي TH17 از ساير لنفوسيت‌ها از ماركر‌هاي CD4 و IL-17 مي‌توان استفاده نمود. بهترين روش براي شناسايي اين سلول‌ها در خون محيطي روش فلوسايتومتري مي‌باشد. در اين مطالعه براي تعيين غلظت TH17 غلظت‌هاي مختلف مواد تحريك كننده و زمان انكوباسيون متفاوت را بررسي كرديم. روش‌ها: در نمونه‌ي خون هپارينه يك داوطلب، لنفوسيت‌هاي با استفاده از فايكول جدا و سه غلظت متفاوت از سوسپانسيون سلولي در كنار سه غلظت متفاوت از PMA، يونومايسين و موننسين كشت داده شد (از هر غلظت سه سري) و در سه زمان متفاوت (6، 12 و 20 ساعت) در 37 درجه‌ي سانتي‌گراد تحت شرايط CO2 انكوبه شد. يافته‌ها: درصد لنفوسيت‌هاي TH17 در سوسپانسيون سلولي 106 × 2 سلول بود كه همراه با غلظت 150 نانوگرم در ميلي‌ليتر PMA، 1.5 ميكرومول يونومايسين و 500 نانوگرم در ميلي‌ليتر موننسين كشت داده شده و 12 ساعت انكوبه شده بود، مشخص گرديد. نتيجه‌گيري: هر آزمايشگاهي بايد با توجه به شرايط و دستگاه‌هاي موجود روش بهينه‌ي خود را تعيين كند.