مقايسه‌ي تأثير داربست‌هاي آلژينات و كيتوسان ژلاتين در توليد ماتريكس خارج سلولي در سلول‌هاي نوكلئوس پالپوزوس ديسك بين مهره‌اي

مقدمه: يكي از مهم‌ترين علل كمر درد، تخريب ديسك بين مهره‌اي (Intervertebral disc يا IVD) است. تخريب IVD در اثر كاهش تعداد سلول‌ها و كاهش توليد و تخريب ماتريكس خارج سلولي (Extracellular matrix يا ECM) بافت IVD به خصوص در ناحيه‌ي نوكلئوس پالپوزوس (Nucleus pulposus يا NP) ايجاد مي‌شود. در مهندسي بافت از داربست‌هاي طبيعي و غير طبيعي مختلف براي ترميم و بازسازي IVD استفاده مي‌گردد. اگركان يكي از پروتئوگليكان‌هاي مهم در بافت NP ديسك مي‌باشد. هدف اين مطالعه، مقايسه‌ي ميزان ترشح اگركان توليدي توسط سلول‌هاي NP در IVD انساني در دو داربست آلژينات و كيتوسان- ژلاتين بود. روش‌ها: سلول‌هاي NP با تجزيه‌ي آنزيمي كلاژناز از بافت NP بيماران مبتلا به فتق IVD در بيمارستان الزهراي (س) اصفهان تهيه گرديد. محلول كيتوسان با محلول ژلاتين مخلوط شد. مخلوط حاصل پس از Freeze drying، به عنوان داربست مورد استفاده قرار گرفت. داربست آلژينات نيز تهيه گرديد. سوسپانسيون سلولي حاوي سلول‌هاي NP جداشده، به دو داربست منتقل و تا 14 روز كشت داده شد. براي بررسي ميزان ترشح اگركان از تكنيك ELISA و براي بررسي مورفولوژي سلول‌ها نيز از ميكروسكوپ نوري استفاده شد. يافته‌ها: ميزان ترشح اگركان از روز 3 تا 14 به صورت معني‌داري افزايش داشت. مقايسه‌ي ميزان ترشح در دو داربست آلژينات و كيتوسان- ژلاتين نشان داد كه اختلاف معني‌داري بين دو داربست در روزهاي 7 و 14 كشت وجود داشت، ولي در روز 3 كشت اين اختلاف معني‌دار نبود. با توجه به نتايج، ميزان ترشح ماتريكس خارج سلولي توسط سلول‌هاي نكلئوس پالپوزوس در داربست آلژينات نسبت به داربست كيتوسان- ژلاتين اختلاف معني‌داري داشت. نتيجه‌گيري: داربست آلژينات نسبت به داربست كيتوسان- ژلاتين محيط مناسب‌تري براي ترشح ECM توسط سلول‌هاي NP انساني در In vitro فراهم مي‌كند و پيشنهاد مي‌شود ازاين داربست براي كشت سلول‌هاي NP در In vivo استفاده گردد.