تأثير سيلي مارين بر بيان ژن Neuro D1 و بررسي سطح گلوكاگون خون در رت هاي ديابتي شده با استرپتوزوتوسين

The Effect of Silymarin on Neuro D1 Gene Expression and Blood Glucagon Level in Streptozotocin-Induced Diabetic Rats

باتوجه­ به آمار بالاي ديابت در ايران و جهان و هم­چنين به­علت عوارض جانبي كم­تر گياهان دارويي نسبت­به داروهاي شيميايي و صنعتي در اين مطالعه به بررسي اثر ماده مؤثره گياه خار مريم (سيلي­مارين) بر بيان ژن Neuro D1 كه يكي از ژن­هاي تكوين و بازسازي سلول­هاي بتا وآلفا پانكراس هست هم­چنين بررسي سطح گلوكاگون خون در رت­ها، پرداختيم. مواد و روش ­ها: 42 سر رت نر نژاد ويستار به­ صورت تصادفي انتخاب شدند و به هفت گروه شش تايي تقسيم شدند. رت­هاي ديابتي شده دوزهاي مختلف سيلي­مارين و متفورمين را هر سه روز يك­بار دريافت كردند و بعد از 40 روز با كلروفوم بي­هوش كرده بعد از خون­گيري از قلب رت­ها سطح سرمي گلوكاگون توسط كيت سنجش گلوكاگون به روش اليزا اندازه­گيري شد و سپس مراحل تشريح و عمل برداشت بافت پانكراس و مراحل استخراج RNA و cDNA سازي و بررسي بيان­ژن با تكنيك Real-Time PCR انجام گرديد. يافته­ ها: نتايج اين تحقيق نشان داد STZ باعث تخريب بافت پانكراس وايجاد ديابت نوع يك مي­شود. كاربرد سيلي­مارين باعث بهبود ديابت و كاهش قند خون و افزايش سطح سرمي گلوكاگون در رت­هاي دريافت­ كننده دوزهاي مختلف سيلي­مارين نسبت­به گروه كنترل منفي (ديابتي) شد. هم­چنين ميزان بيان ژن NeuroD1 نسبت­به ژن GAPDH (ژن رفرنس) افزايش معني­داري پيدا كرد. نتيجه ­گيري: بيان­ژن NeuroD1در رت­هاي ديابتي شده با STZ به ­واسطه سيلي­مارين، افزايش معني­داري را نشان مي­دهد (000/0P-Value= ) كه نتيجه آن بهبود بافت پانكراس و كاهش قند خون و افزايش وزن رت­ها و سيلي­مارين با بازسازي سلول­هاي آلفاي پانكراس و هم­چنين با اتصال به پروموتر ژن گلوكاگون باعث افزايش بيان اين ژن مي­شود.

Due to the high rates of diabetes in Iran and the world, as well as due to the lower side effects of medicinal plants in comparison with chemical and industrial drugs, this study investigated the effect of the active ingredient of Mary Magenta (Silybum marianum) on the expression of the Neuro D1 gene, one of the genes of the genes and the restoration of beta and alpha pancreatic cells is also a study of blood glucagon levels in rats. Material and methods: 42 male Wistar rats were randomly selected and divided into seven groups of six. Diabetic rats received different doses of silymarin and metformin every other day for 1-3 days and after 40 days anesthetized with chloroform. After blood sampling, the serum glucagon level was measured by glucagon assay kit ELISA Then, the stages of the description and operation of pancreatic tissue extraction and extraction of RNA and cDNA were performed and expression analysis was performed using Real Time RT-PCR technique. Results: The results of this study showed that STZ causes the destruction of pancreatic tissue and type 1 diabetes. Application of Silymarin improved diabetes and decreased glucose levels and increased serum glucagon levels in rats receiving different doses of silymarin compared to the control group (diabetic). Also, the expression level of NeuroD1 gene increased significantly compared to the GAPDH gene (reference gene). Conclusion: The expression of NeuroD1 gene in STZ-induced diabetic rats showed a significant increase (P-Value = 0.000), which resulted in improved pancreatic tissue and decreased blood glucose and increased rats and muscle mass by regenerating cells The pancreatic alpha, as well as the binding to the promoter of the glucagon gene, enhance the expression of this gene.