جداسازي و شناسايي مولكولي باكتري هاي توليدكننده كاروتنوئيد

توليد رنگدانه از باكتري ها به علت مقرون به صرفه بودن، محصول بيشتر و استخراج آسان تر نسبت به ساير منابع از اهميت خاصي برخوردار است. كاروتنوئيد ها، از مهمترين رنگدانه ها با خواص آنتي اكسيداني، پيش ساز ويتامينA ، افزايش دهنده توليد آنتي بادي، ضد تومور و پيشگيري كننده از بيماري هاي قلبيعروقي هستند. هدف از اين مطالعه جداسازي و شناسايي مولكولي باكتري هاي توليدكنندۀ رنگدانه كاروتنوئيدي و آناليز آن با روش HPLC بود. تعداد 20 نمونه خاك از مناطق مختلف شهر تهران جمع آوري شد. پس از رقت سازي، نمونه ها بر روي محيطBHI آگار كشت و در دماي 37 درجه سانتي گراد گرماگذاري شد. باكتري هاي توليدكننده رنگدانه براي شناسايي بيشتر انتخاب و استخراج رنگدانۀ آنها بوسيله متانول انجام شد. غربالگري باكتري هاي توليدكننده رنگدانه در دو سطح انجام گرفت: انتخاب سويه ها با استفاده از رنگ قابل مشاهده؛ آناليز عصاره ها با طيف سنجي UVVIS و تأييد توسط كروماتوگرافي مايع با كارايي بالا .(HPLC) ابتدا، جدايه ها با استفاده از روش هاي فنوتيپي شناسايي شد و ژن 16S rDNA آنها با روش PCR تكثير و تعيين توالي شد. Staphylococcus epidermidis، Micrococcus aloeverae، Citricoccus alkalitolerans، Rhodococcus zopfii، Arthrobacter agilis،Dietzia natronolimnaea وRhodococcus ruber به عنوان سويه هاي توليدكنندۀ كاروتنوئيد شناسايي شدند .بالاترين ميزان جذب با استفاده از آناليز طيف سنجي UVVIS در Staphylococcus epidermidis و Dietzia natronolimnaea مشاهده شد. آناليز HPLC نشان داد كه كاروتنوئيدهاي توليد شده در مقايسه با منحني بتا كاروتن استاندارد، متعلق به بتاكاروتن هستند. ميكروارگانيسم ها منبع بالقوه اي براي توليد كارتنوئيدها هستند. در اين مطالعه، ما دو جنس باكتري (Staphylococcus epidermidis و Dietzia natronolimnaea) با توانايي بالاي توليد كارتنوئيد معرفي كرديم.