بررسي اثر نانوذرات اكسيد مس بر ژنوم باكتري سالمونلا تيفي موريوم با استفاده از نشانگرهاي مولكولي RAPD

An investigation of the effect of copper nanoparticles on Salmonella tifi morum genome by RAPD molecular markers

باكتري سالمونلا يكي از كشنده‌ترين باكتري‌هايي است كه در عفونت‌هاي همه گير، نقش دارد. از طرفي افزايش مقاومت آنتي بيوتيكي در باكتري‌ها باعث شده است كه تحقيقات فراواني در جهت معرفي روش‌هاي جايگزين براي مقابله با باكتري‌هاي بيماريزا صورت پذيرد. در اين تحقيق به منظور مطالعه‌ي يكي از مكانيسم‌هاي مولكولي احتمالي نانوذرات اكسيد مس، باكتري سالمونلا تيفي موريوم به عنوان مدل براي باكتري‌هاي گرم منفي انتخاب شده است كه تاثير نانوذرات اكسيد مس بر روي ژنوم اين باكتري بررسي گرديد. ابتدا باكتري سالمونلا در محيط كشت بلاد آگار سپس در محيط كشت BHB، كشت داده شد. تيمار باكتري در غلظت هاي 30، 60، 90 و 120 ميكروگرم بر ميلي‌ليتر انجام گرفته و در فاصله هاي زماني 2، 4 و 24 ساعت خاصيت ضد ميكروبي نانوذره بررسي گرديد. استخراج DNA از نمونه‌هاي شاهد و تيمار شده انجام شد و تغييرات توالي ژنوم باكتري با استفاده از تكنيك RAPD-PCR مورد مطاله قرار گرفت. با استفاده از نرم افزار NTSYS-PC، نتايج حاصل از الكتروفورز محصولات PCR روي ژل آگارز مورد تجزيه و تحليل قرار گرفت. نتايج اين مطالعه نشان داد كه نانوذرات اكسيد مس باعث ايجاد تغيير توالي در قسمت هاي مختلف ژنوم باكتري سالمونلا با غلظت‌هاي 90 و 120 ميكروگرم بر ميلي ليتر گرديد. از اين تغييرات مي توان نتيجه گرفت كه يكي از مكانيسم هاي مولكولي اثر مهارگنندگي رشد باكتريايي اين نانوذرات ايجاد تغيير توالي در DNA ژنومي مي‌باشد. نانوذرات اكسيد مس احتمالا باعث تغيير خاصيت جفت شدن بازي بازها و يا باعث ايجاد اختلال در مكانيسم همانند سازي شده است.

Salmonella is the serious and prevalent bacteria that has important role in epidemic infections. Beside increase of antibiotics resistance in bacteria make that abundance researches did for introduction of replacement method for beard with bacteria infections. Copper NANO oxide particles are components that their anti-microbial nature be evidenced. In this research for discover of NANO particles probably mechanism on the genome of bacteria, salmonella selected as a model for Gram-negative bacteria. In this regard, at first the bacteria were treated with 30 and 60 µg/ml copper oxide NANO particles. At time intervals of 2, 4, and 24 hours. In this doses, bacteria was growth .So bacteria were treated with 90 and 120 µg/ml copper oxide NANO particles. In these doses growth of bacteria even after 24 h completely were stopped .Then their DNA were extracted. In order to investigate the effects of copper oxide NANO particles on the genome, the chain reaction techniques of (RAPD-PCR) was employed .Using the software NTSYS-PC, the results obtained from electrophoresis of PCR products on agarose gel were analysis. The results of the study revealed that copper oxide NANO particles not only affects the growth of bacteria but also affect the sequencing of genomic DNA and leads to the changes of them in different points.