اثر سميت سلولي عصاره هيدروالكلي برگ دغدغك Colutea persica در مقايسه با داروي ضد سرطان دوكسوروبيسين بر تكثير رده ‫هاي سلولي سرطان پستان و پروستات

Cytotoxic Effect of Hydroalcholic Extract of Colutea persica Leaf Compared to Doxorubicin on the Human Prostate (LNCaP) and Breast (MCF-7) Cancer Cell Lines

زمينه و هدف: سرطان يكي از عوامل اصلي مرگ و مير در دنيا است. اين تحقيق به منظور بررسي اثرات سميت سلولي عصاره هيدروالكلي برگ دغدغك بر روي رده ­هاي سلول­ هاي سرطاني سينه و پروستات و اثر افزايشي آن با دوكسوروبيسين انجام گرفت. روش­ كار: عصاره هيدروالكلي برگ دغدغك با روش خيساندن و حلال­ اتانول ­70% تهيه شد. غلظت­ هاي10­، 7/5، 5، 2/5، 1/25، 0/625، 0/312 و 0/156 ميلي ­گرم بر ميلي ­ليتر از عصاره و غلظت­ هاي 20،80، 320 و 640 نانومولار از دوكسوروبيسين تهيه شد و اثر هم­افزايي غلظت 20 نانومولار دارو و غلظت 0/156ميلي­ گرم بر ميلي­ ليتر عصاره مورد بررسي قرار گرفت. رده­ هاي سلولي سرطان پستان (MCF7)، پروستات (LNCaP) و فيبروبلاست (SKM) كشت داده شدند. تست MTT جهت بررسي اثرات سميت سلولي عصاره بر روي رده­ هاي سلولي در مدت 24­، 48 و 72 ساعت انجام گرفت و ميزان آپوپتوز در رده­ هاي سلول­ هاي سرطاني از روش Annexin/PI سنجش شد. يافته­ ها­: عصاره ­ها داراي سميت سلولي بودند و درصد زنده ­ماني سلول­ هاي سرطاني نسبت به فيبروبلاست كم­تر بود، در مدت زمان­هاي مختلف، غلظت ­10 ميلي­ گرم بر ميلي­ ليتر عصاره بيشترين اثر مهار رشد روي سرطان پستان و پروستات نشان داد، اثر تركيبي عصاره و دارو در هيچ يك از رده ­هاي سلولي نسبت به كنترل در سطح 1 درصد معني­ دار نبود. نتايج Annexin/PI نشان­داد ميزان آپوپتوز اوليه، تاخيري و نكروز در رده ­هاي سلولي تيمار شده نسبت به بدون تيمار افزايش داشته است. نتيجه­ گيري: عصاره هيدروالكلي برگ دغدغك توانايي مهار رشد سلول­ هاي سرطاني و القاء آپوپتوزيس سلول­ هاي سرطاني سينه و پروستات را دارد.

Background & objectives Cancer is the leading cause of death worldwide. In this study, the cytotoxic effect of hydroalcoholic extract of Colutea persica leaf and its synergic effect with doxorubicin were investigated on MCF-7, LNCaP and SKM (as control) cell lines. Methods Hydroalcoholic leaf extract of Colutea persica was prepared using maceration method and ethanol 70%. Breast cancer (MCF7), prostate (LNCaP) and fibroblast (SKM) cell lines were cultured in microplates (96 wells) and exposed to various concentrations (10, 7.5, 5, 2.5, 1.25, 0.625, 0.312 and 0.156 mg/ml) of plant extract and doxorubicin (20, 80, 320 and 640 nM) solution. The synergistic effect of 20 nanomol of drug and 0.156 mg / ml of the plant extract was investigated. MTT assay was employed to evaluate the cytotoxic effects of the extract on cell lines at different time intervals (24, 48 and 72 hours). Staining with annexin V and propidium iodide (PI) was used to identify different types of cell death either necrosis or apoptosis. Results The plant extracts had cytotoxic effect and cell viability rate was lower than fibroblasts. At different times, the concentration of 10 mg /ml of the extract showed the most growth inhibition of breast and prostate cell lines. The combination effect of plant extract with doxorubicin on cells was not significant (p<0.01). The Annexin V/PI flow cytometry results showed that the percentage of initial apoptosis, delayed apoptosis and necrosis in treated cells increased compared to untreated cell. Conclusion Hydroalcoholic extract of Colutea persica leaf inhibits the growth of cancer cells and induce apoptosis in breast and prostate cancer cells.