شناسايي مولكولي جدايه هاي لاكتيكي بدست آمده از چال در استان گلستان و بررسي فعاليت ضد قارچي لاكتوباسيلوس برويس و انتروكوكوس فاسيوم ايزوله شده عليه پني سيليوم كرايسوزنوم

Molecular identification of Lactic Acid Bacteria strains isolated from Chal in Golestan province and study of antifungal activity of Lactobacillus brevis and Enterococcus faecium isolates against Penicillium chrysogenum

هدف از انجام اين پژوهش شناسايي مولكولي لاكتوباسيلوس هاي جدا شده از چال (شير تخميري شتر) و بررسي فعاليت ضد قارچي لاكتوباسيلوس برويس و انتروكوكوس فاسيوم جدا شده به عنوان نگهدارنده اي زيستي عليه كپك پني سيليوم كرايسوژنوم بود. در اين پژوهش پس از انجام PCR با جفت پرايمرهاي عمومي باكتري هاي اسيد لاكتيك، نتايج توالي يابي با توالي هاي موجود در پايگاه اطلاعاتي NCBI مقايسه شد. از بين جدايه هاي شناسايي شده، اثر ضدقارچي جدايه هاي CA ، C6 و C17 به عنوان نگهدارنده بيولوژيكي با استفاده از روش دولايه مورد بررسي قرار گرفت. براساس شناسايي آناليز ناحيه ژني 16s rDNA باكتري هاي جدا شده 2 نژاد از لاكتوباسيلوس برويم (كدهاي 6 و C17)، يك نژاد انتروكوكوس هيرايي (كد C7) و يك نژاد انتروكوكوس فاسيوم ( كد 08) بودند. نتايج نشان داد كه هر دو جدايه لاكتوباسيلوس برويس و جدايه انتروكوكوس فاسيوم داراي اثر بازدارندگي قوي اي بر رشد پني سيليوم كرايسوزنوم مي باشند. اين بازدارندگي بعد از 48 ساعت براي سويه لاكتوباسيلوس برويس بيشتر از ديگر سويه ها بود. اثر همه تيمارها با نمونه شاهد بدون باكتري هاي لاكتيكي) داراي اختلاف معني داري (0.05>P، ولي با يكديگر اختلاف معني داري نداشتند (0.05

The aim of this study was to identify the LAB strains isolated from Chal by the molecular method and to study antifungal activity of Lactobacillus brevis and Enterococcus faecium isolates as a biological preservative against Penicillium chrysogenum. The LAB isolates were identified using PCR technique with universal primers of LAB, sequencing of PCR products and comparing the sequencing results with the data available in NCBI. The antifungal effects were determined using overlay method to investigate the potential application of tested isolates as a biological preservative agent. Analysis of 16S rDNA gene sequences revealed two strains as L. brevis, one E. hirae and one E. faecium. The results of antifungal activity showed that both isolates of L. brevis and E. faecium had a strong inhibitory effect against P. chrysogenu so that the growth inhibition, after 48 hours, for strain C6 was more than the other strains. All treatments showed significant differences (P<0.05) with the control samples but were not significantly different (P>0.05) between treatments samples. Inhibitory percentage of both strains of L. brevis (C6 and C17) against P. chrysogenum was stronger than the strain of E. faecium (C8) against the mold. All treatments showed significant differences (P<0.05) with control samples but there were no significant differences (P>0.05) between the treatments samples. According to the results from present work can conclude that the tested isolates have a potential ability to prevent the microbial spoilage, in foods such as cheese that susceptible to spoil with P. chrysogenum, as natural and safe bio-preservative.