تجزيه‌وتحليل‌هاي ساختار ثانويه RNA و qRT-PCR مرتبط با anti-CD25 CAR بيان‌شده در رده‌ي سلولي NK-92

زمينه و هدف: سلول هاي T تنظيم كننده ي رخنه كننده در تومور (TI-Treg) عملكرد مهمي را در فرار سرطان از سيستم ايمني اجرا مي كنند. در اين پژوهش، نسل سوم سازه ي CAR عليه آنتي ژن CD25 انساني به عنوان نشانگر زيستي مهم سطح سلول هاي TI-Treg طراحي شده است.روش بررسي: ابتدا سازه ي anti-CD25 CAR طراحي شد. با استفاده از وب سرور RNAfold، ساختار ثانويه RNA ارزيابي شد. همچنين با استفاده از وكتورهاي لنتي ويروسي، رده ي سلولي NK92 ترابرد شد. سپس سطح بيان RNA anti-CD25 CAR به وسيله qRT-PCR در سلول هاي NK92 ترابردشده با وكتورهاي انتقالي CAR و تقليدي و همچنين سلول هاي تيمارنشده ارزيابي شد.يافته ها: ساختار ثانويه ي RNA پايدار بود. همچنين سطح بيان RNA anti-CD25 CAR در سلول هاي NK92 ترابردشده به وسيله ي وكتور انتقالي pCDH-513B-1-anti-CD25 CAR به طور معني داري بيش از سلول هاي NK92 ترابردشده با وكتور انتقالي تقليدي و سلول هاي تيمارنشده بود (P˂0.0001).نتيجه گيري: مطالعه حاضر روي anti-CD25 CAR RNA نشان داد رونوشت هاي اين نوع CAR پايدار بود و در سطح بالايي بيان شد. درواقع، اين نوع CAR مي تواند در آينده همچون ابزاري براي حذف فرار سرطان از سيستم ايمني در انواع سرطان هاي جامد و مايع بيشتر بررسي شود.