جداسازي و تعيين خصوصيات اگزوزوم‌هاي جدا شده از سلول‌هاي بنيادي مزانشيم با استفاده از روش اولترا سانتريفيوژ و پلي‌اتيلن‌گليكول

مقدمه: اگزوزوم‌هاي مشتق از سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي، مي‌توانند عملكرد مشابهي با سلول‌هاي بنيادي مزانشيم در ترميم بافت‌هاي آسيب ديده و همچنين، تعديل پاسخ‌هاي ايمني داشته باشند. امروزه، اين اگزوزوم‌ها، به عنوان ابزار كارآمدي در طب ترميمي و همچنين، بيماري‌هاي خود ايمن و سرطان مورد توجه قرار گرفته‌اند.روش‌ها: سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي، از بافت چربي موش جدا شدند و هويت آن‌ها تعيين گرديد. از سوپ رويي سلول‌ها با استفاده از دو روش اولترا سانتريفيوژ با دور g 110000 و پلي‌اتيلن‌گليكول (Polyethylene glycol يا PEG) جهت استخراج اگزوزوم استفاده شد. براي بررسي صحت اگزوزوم‌هاي جدا شده، از روش‌هاي Dynamic light scattering (DLS)، ميكروسكوپ الكتروني نگاره،گذاره و آزمون Bradford استفاده شد.يافته‌ها: نتايج حاصل از جداسازي اگزوزوم‌هاي مشتق از سلول‌هاي بنيادي مزانشيمي با استفاده از PEG نشان داد كه بيشترين اگزوزوم‌هاي كروري استخراج شده در محدوده‌ي 30050 نانومتر بودند، اما روش اولترا سانتريفيوژ محدوده‌ي 10030 نانومتري را نشان داد. با استفاده از آزمايش Bradford، ميزان غلظت اگزوزوم‌هاي استخراج شده با استفاده از اولترا سانتريفيوژ 1296.7 ميلي‌گرم/ميلي‌ليتر و ميزان غلظت اگزوزوم‌هاي استخراج شده با استفاده از PEG 1322.4 ميلي‌گرم/ميلي‌ليتر گزارش شد.نتيجه‌گيري: در مقايسه‌ي دو روش جداسازي اگزوزوم‌ها، نتايج نشان داد كه ذرات استخراج شده با روش اولترا سانتريفيوژ داراي خلوص بيشتري مي‌باشند، اما در روش PEG، به علت رسوب PEG بر روي ذرات، اگزوزوم‌ها داراي ابعاد بزرگ‌تر و خلوص كمتري مي‌باشند، اما در نهايت، به علت دسترسي كمتر به اولترا سانتريفيوژ با دور بالا، جداسازي به روش PEG نيز كاربردي است.