بيان ژن‌هاي hly و inlA باكتري Listeria monocytogenes در وضعيت زنده اما غير قابل كشت (VBNC) در دماي 4 درجه سانتي‌گراد

Expression of the hly and inlA genes of Listeria monocytogenesgenes bacteria in viable but non-culturable (VBNC) condition in temperatures of 4 degrees Celsius

زمينه و هدف: ليستريا مونوسيتوژنز (Listeria monocytogenes) يك پاتوژن غذازاد گرم مثبت است كه سرما دوست بوده و توانايي تحمل درصد بالاي نمك بيش از ده درصد را دارد. اين باكتري در بسياري از محصولات غذايي كه مدت زمان نگهداري طولاني دارند رشد مي‌كند. اين مطالعه به منظور ارزيابي بيان ژن‌هاي hly و inlA باكتري ليستريا مونوسيتوژنز در وضعيت زنده اما غير قابل كشت (Viable But non-Culturable state: VBNC) در دماي 4 درجه سانتي‌گراد انجام شد. روش بررسي: در اين مطالعه توصيفي آزمايشگاهي 106 باكتري در اواسط رشد لگاريتمي به محيط كشت BHI Agar غني تلقيح و تا زمان از دست رفتن كشت در دماي يخچال (4 درجه سانتي‌گراد) بررسي و نگهداري شد. در انتهاي دوره ژن 16S rRNA همچنين ژن‌هاي hly و inlA به‌عنوان ژن‌هاي بيماري‌زايي اين باكتري مورد بررسي قرار گرفتند. بررسي بيان اين ژن‌ها قبل و بعد از ورود به حالت VBNC، به منظور مقايسه بيان آنها انجام گرديد. يافته‌ها: باكتري ليستريا پس از 5 ماه نگهداري در دماي يخچال توانايي كشت‌پذيري خود را از دست داد. نتايج بررسي بيان ژن نشان داد كه در انتهاي دوره باكتري وارد حالت «زنده اما غير قابل كشت» شد. همچنين ژن‌هاي بيماري‌زايي hly و inlA آن در محيط غني شده نيز بيان نشدند. با افزودن خون به محيط كشت غني اين باكتري ژن بيماري‌زايي همولايزين O مجدداً روشن گرديد. نتيجه‌گيري: نتايج اين مطالعه نشان داد كه امكان ورود باكتري به حالت VBNC در شرايط يخچال وجود دارد و بيان ژن‌هاي بيماري‌زايي آن تحت تاثير قرار مي‌گيرد. خون و فاكتورهاي آن به عنوان عامل القا كننده براي ژن hly مي‌تواند عمل كند. از اينرو بازبيني فرايندهاي كنترل كيفيت ميكروبي فرآورده‌هاي شيلاتي ضروري به‌نظر مي‌رسد.

Background and Objective: Listeria monocytogenes is a gram-positive and foodborne pathogen that is psychrophilic and has the ability to tolerate a high percentage of salt by more than 10%. This bacterium grows in many food products that have a long shelf life. This study was performed to evaluate the expression of genes hly and inlA of Listeria monocytogenes bacteria in the viable but non-culturable (VBNC) condition in temperatures of 4 degrees Celsius. Methods: In this descriptive laboratory study, bacteria in 106 counts in mid log phase were inoculated into BHI Agar rich medium and It was investigated and stored at refrigerated temperature (4 degrees Celsius) until the cultivate was lost. At the end of the 16S rRNA gene, the hly and inlA genes were studied as pathogenic genes of this bacterium. The expression of these genes before and after entering to VBNC state was performed to compare their expression. Results: Listeria bacteria lost its cultivation ability after 5 months of storage at a refrigerated temperature. The results of the gene expression analysis showed that at the end of the period, the bacterium entered "Viable But non-Culturable" form; also the hly and inlA pathogenic genes were not expressed in riched medium. By adding blood to the rich culture medium of this bacterium, the hemolysin O pathogen gene was re-illuminated. Conclusion: The results of this study show that the possibility of bacterial entry into VBNC mode occurs at the refrigerator condition, and the expression of its pathogenic genes is affected. Blood and its agents can act as an agent for the induction and clarification of the hly gene. Therefore, it is necessary to review the microbial quality control of fishery products.