شناسايي باكتري هاي غالب در خلط مصدومين شيميايي با استفاده از تكنيك PCR-DGGEو روش هاي وابسته به كشت

Identification of Dominant Bacteria in Sputum of Chemical Injured Patients by Using PCR-DGGE Technique and Culture-Dependent Method

سابقه و هدف بسياري از مصدومين شيميايي به دليل مواجه شدن با گاز سمي خردل، به بيماريهاي مزمن ريوي دچار مي باشند. عفونت دستگاه تنفسي از عوامل تشديد علائم بيماري هاي مزمن ريوي است. بنابراين حذف عفونت تنفسي اين بيماران در كاهش علائم بيماريهاي مزمن ريوي موثر است. هدف از اين مطالعه تعيين جمعيت ميكروبي در خلط بيماران شيميايي است كه به دو روش وابسته به كشت و PCR-DGGEانجام ميشود. روش كار پس از استخراج DNAو انجام PCRبه كمك پرايمرهاي يونيورسال، محصولات PCRكه حاوي قطعات S rDNA16 متعلق به باكتريهاي مختلف بودند در ژل حاوي ماده دناتوره كننده ي DGGEبارگذاري شد و سپس الكتروفورز انجام گرفت. پس از جدا شدن قطعات متفاوت DNAبر روي ژل، باندهاي تكرارشونده در نمونه هاي مختلف جدا شد و مجددا با انجام ،PCRتكثير گرديد. سپس بر اساس توالي هاي به دست آمده آناليز فيلوژنتيك انجام شد. به منظور جداسازي عوامل ميكروبي از محيط هاي كشت عمومي استفاده شد. از كلني هاي جدا شده كشت مجدد تهيه و سپس، رنگ آميزي گرم انجام شد. با توجه به نتيجه رنگ آميزي گرم، به منظور شناسايي ميكروبي از تستهاي افتراقي استفاده گرديد. يافته ها در تكنيك PCR-DGGEو تكنيك وابسته به كشت باكتري استافيلوكوكوس اورئوس به عنوان باكتري تكرار شونده در نمونه هاي مورد بررسي شناسايي شد. نتيجه گيري از آنجائي كه روشهاي سنتي شناسايي ميكروبي بسيار وقت گير است، تكنيك PCR-DGGEميتواند به عنوان يك تكنيك سريع و كارآمد براي بسياري اهداف از جمله شناسايي باكتري غالب در جمعيت هاي ميكروبي مورد استفاده قرار گيرد.

Background an‎d Objective Immunization is one of the most efficacious, cost-effective and safe public health interventions. Vaccines continue to have a tremendous impact on public health, saving millions of lives each year.Thepurpose of this study was determining vaccination coverageand reasons for non- vaccination in children (24-36 month old)that live in marginalized area in Kermanshah city Materials an‎d Methods In this descriptive analytic study, 420 children (24-36 month old)were selected. Sampling method was cluster sampling and included 60 clusters with7children who live in slum area in Kermanshah city. Information was collected by a questionnaire referring to childrensvaccination card. Data collected were analyzed usingSPSS v13 software and chi-square. Results In this study,46.2% girls and 53.8% 8 % boys participated. The coverage of at birth doses including BCG, HepatitisB1 and Polio0 were 100%, DTP3, Polio3, Hepatitis B3 and MMR1 vaccines were more than 97%.There was significant difference between vaccine status and mother's education(P<0/001).Non immunization was observed in 3% children. The most common cause was lack of maternal knowledge (50%). Conclusion It seems vaccination coverage in children (24-36 month old) is proper; however it is suggested to use of catch up program for high risk groups to increase vaccination overage.