شناسايي مولكولي ژنهاي حدت چسبندگي، نكروز كننده و هموليزين در سويه هاي UPEC و APEC جدا شده از نمونه‌هاي باليني و طيور

Molecular identification of adhesion, necrosis and hemolysin genes in UPEC and APEC strains isolated from clinical specimens and poultry

زمينه و هدف: اشريشياكلي اوروپاتوژنيك (Uropathogenic Escherichia coli) و اشريشياكلي‌هاي بيماريزاي پرندگان (Avian Pathogenic Escherichia coli ) واجد محدوده وسيعي از فاكتورهاي حدت در انسان و طيور مي‌باشند. اين فاكتورها در ايجاد كلونيزاسيون، تهاجم و متعاقب آن كاهش پاسخ دستگاه ايمني ميزبان نقش دارند كه شامل ژن‌هاي pap،sfa،afa،hly و cnf مي‌باشند. هدف اين مطالعه رديابي مولكولي ژنهاي چسبندگي، نكروز كننده و هموليزين پاتو وارهاي UPEC, APEC اشريشياكلي جدا شده از انسان و طيور است. روش ‌بررسي: در مجموع 36 جدايه اشريشياكلي از نمونه هاي باليني بيماران داراي عفونت ادراري پذيرش شده در بيمارستانهاي كرمان و 36 جدايه اشريشياكلي طيور از دانشكده دامپزشكي استان كرمان اخذ گرديد. جدايه ها بر اساس تست هاي بيوشيميايي و باكتريولوژي استاندارد تشخيص داده شدند. به منظور شناسايي ژن هاي حدت pap،sfa،afa،hly و cnf واكنش PCR Multiplex- در شرايط آزمايشگاهي انجام شد. يافته‌ها: بررسي ژن‌ها نشان داد كه در نمونه‌هاي طيور تعداد 10 جدايه (27/7) درصد حاوي ژنهاي حدت و 22 جدايه (1/)61 درصد در نمونه‌هاي انساني از نظر حضور ژن مثبت بودند. ژنهاي cfa و cnf در هيچ يك از نمونه‌هاي انساني و طيور رديابي نگرديد. بيشترين فراواني مربوط به ژن pap با (33/33) درصد در نمونه‌هاي طيور و (13/8) درصد در نمونه-هاي انساني گزارش شد. نتيجه‌گيري: روش PCR راهي در جهت تشخيص سريع فاكتور هاي حدت در اشريشياكلي جدا شده از نمونه هاي دامي و انسان بوده كه مي‌توان از نحوه انتشار و منشاء آلودگي، جهت بررسي‌هاي اپيدميولوژيكي و مبارزه سريع با بيماري استفاده نمود.

Background and Aim: Uropathogenic Escherichia coli (UPEC) and Avian pathogenic Escherichia coli (APEC) is produce a wide range of human and animal virulence factors. These factors create colonization, invasion and the subsequent decline in the host immune response. These factors are include pap, sfa, afa, hly and cnf genes. The aim of this study was to molecular identification of adhesion, necrosis and hemolysin genes in UPEC an APEC isolated from poultry and humans samples. Materials and Methods: A total of 36 isolates from clinical samples from patients with urinary tract infections in hospitals in Kerman and 36 poultry isolates were obtained from the veterinary faculty of Kerman province. Isolates were identified by standard biochemical tests. In order to identify, in vitro amlification Multiplex-PCR were performed for pap, sfa, afa, hly and cnf genes. Results: Genes analysis showed that in the poultry samples, 10 (27.7%) of the isolates contained acute genes and 22 (61.1%) of the isolates were in the human specimens in terms of presence of the gene. Cfa gene and cnf were not detected poultry and humans in any of the samples. The highest frequency of pap gene was reported in 33.33% in poultry samples and 13.8% in human samples. Conclusion: The PCR method is a way in early detection of virulence factors in Escherichia coli isolates from animal and human but Epidemiological studies and rapid struggle with the disease can be used to determine the distribution and source of contamination.