شيوع استافيلوكوكوس اورئوس مقاوم به متي سيلين به كمك روش هاي فنوتيپي و ژنوتيپي در نمونه هاي باليني جمع آوري شده از بيمارستان هاي آموزشي مازندران 1393-1394

Prevalence of Mmethicillin-Resistant Staphylococcus aureus Isolated from Clinical Specimens of Teaching Hospitals in Mazandaran using phenotypic and genotypic methods.2014-15

سابقه و هدف: استافيلوكوكوس اورئوس يكي از عوامل اصلي عفونت هاي بيمارستاني به شمار مي رود. از دهه 1990 اولين استافيلوكوكوس اورئوس مقاوم به متي سيلين (MRSA) ظاهر گرديد و به واسطه وجود ژن ، mecAبه تمامي بتالاكتام ها مقاوم گرديد. علاوه بر اين MRSA با در برگرفتن دامنه وسيعي از عفونت هاي پوست و بافت نرم تا پنوموني، به يك نگراني جهاني مبدل گشته است. هدف از مطالعه حاضر تعيين شيوع استافيلوكوكوس اورئوس مقاوم به متي سيلين با روش هاي فنوتيپي و ژنوتيپي از نمونه هاي باليني استان مازندران بود. روش كار: تعداد 118نمونه باليني از بيمارستان هاي آموزشي بابل و ساري جمع آوري گرديد. پس از تعيين هويت جدايه ها توسط آزمون هاي متداول، مقاومت آنها به متي سيلين با روشهاي انتشار از ديسك سفوكسيتين، پليت غربالگري اگزاسيلين و واكنش زنجيره اي پليمراز ژن ،mecA سنجيده شد. همچنين حساسيت جدايه ها نسبت به ساير آنتي بيوتيك ها مطابق آخرين دستورالعمل CLSI ارزيابي شد . يافته ها: از مجموع نمونه هاي باليني جمع آوري شده، تعداد 100جدايه استافيلوكوكوس اورئوس بود. نتايج سنجش حساسيت به متي سيلين با روش هاي انتشار از ديسك سفوكسيتين و غربالگري اگزاسيلين آگار نشان داد كه به ترتيب 66و 71درصد از جدايه ها، مقاوم به متي سيلين بودند. در حالي كه نتايج واكنش زنجيره اي پليمراز، حضور ژن mecAدر 81درصد از جدايه ها را نشان داد. همچنين بررسي الگوي مقاومت جدايه ها به آنتي بيوتيك ها نشان داد كه بيشترين مقاومت نسبت به آمپي سيلين، پني سيلين و آموكسي سيلين ( 100درصد) و كمترين مقاومت نسبت به نيتروفورانتوئين (صفر درصد) بود. همچنين سويه هاي MRSAبه حداقل 10آنتي بيوتيك ديگر نيز مقاوم بودند. نتيجه گيري: روشهاي فنوتيپي سنجش حساسيت به متي سيلين، قابل اعتماد نيستند. بنابراين لازم است اين نتايج با روش هاي ژنوتيپي مانند واكنش زنجيره اي پليمراز نيز تأييد گردد. به علاوه به دليل افزايش مقاومت روزافزون سويه هاي استافيلوكوكوس اورئوس به آنتي بيوتيك ها، تشخيص سريع و تجويز مناسب و منطقي آنتي بيوتيك هاي مؤثر جهت پيشگيري از افزايش مقاومت دارويي، ضروري است.

Background an‎d Objective Staphylococcus aureus has been recognized as a major nosocomial infection. Since the 1960s, the first methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) has appeared and resistant to all beta-lactam antibiotics caused by the mecA gene. In addition, MRSA with a wide range of infections from mild skin and soft tissue infections to life threatening pneumonia has been recently become a worldwide concern. The aim of current study was prevalence of methicillin resistant Staphylococcus aureus isolated from clinical specimens in province of Mazandaran using phenotypic and genotypic methods. Materials an‎d Methods About 118 clinical specimens were collected from teaching hospitals in Babol and Sari. After identification of the isolates using usual tests, resistance to methicillin was investigated using cefoxitin disc diffusion, oxacillin screening plate and polymerase chain reaction (PCR) for mecA gene. In addition, sensitivity of isolates to other antibiotics was determined according to the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). Results From all collected clinical specimens, a total of 100 isolates was identified as Staphylococcus aureus. The results of sensitivity assay to methicillin using cefoxitin disc diffusion and oxacillin screening agar was showed 66% and 71% of the isolates were resistant to MRSA, respectively. However, the results of PCR showed the presence of mecA gene in 81% of isolates. In addition, investigation of resistant pattern to antibiotics among the isolates was shown that the isolates were high resistant to ampicillin, penicillin and amoxicillin (100%) and low resistance to nitrofurantoin (0%). Also, the MRSA strains were resistant to at least 10 more antibiotics. Conclusion The results of current study were shown that phenotypic methods are not reliable for determination of methicillin sensitivity. Therefore it is necessary that these results confirmed with genotypic procedures such as PCR should. Moreover, most of Staphylococcus aureus have become resistant to different antibiotics, rapid diagnosis and also appropriate and reasonable prescription of effective antibiotics in order to prevention of increasing drug resistance is necessary.