اثر ضد بيوفيلم پپتيد ضد ميكروبي مليتين برسويه هاي آسينتوباكتربومانيجدا شده از بيماران دچار عفونت سوختگي

Anti-biofilm Activity of Melittin against Acinetbacter baumannii Strains Isolated from Patients Suffered from Burn Infection

سابقه و هدف: : آسينتوباكتر بوماني يك عامل بيماريزاي خطرناك در ايجاد عفونت سوختگي به شمار مي رود. امروزه تعداد آسينتوباكتريوماني هاي مقاوم به آنتي بيوتيك ها رو به افزايش بوده و پيشنهاد مي شود كه براي درمان اين عفونت ها از پپتيدهاي ضد ميكروبي استفاده شود. بنابراين هدف از اين تحقيق تعيين اثر پپتيد مليتين بر تخريب بيوفيلم سويه هاي آسينتوباكتر بوماني و همچنين اثر كشندگي آن تعيين گرديد. روش كار: مليتين با تكنيك كروماتوگرافي فاز معكوس از زهر زنبور تخليص گرديد. ابتدا ميزان توليد بيوفيلم 25 سويه به روش اسپكتروفوتومتري بررسي گرديد. سپس اثر تخريبي مليتين بر بيوفيلم به روش اسپكتروفوتومتري و اثر كشندگي آن بر باكتري هاي داخل بيوفيلم، به روش كشت بررسي گرديدند. يافته ها: تمام سويه ها توليد كننده بيوفيلم هستند و ميانگين توليد، مقدار 0/98 برآورد گرديد. در تست تخريب مليتين، ميانگين OD از حدود يك به 0/15 كاهش پيدا كرد. نتايج كشت نشان داد كه باكتري هاي داخل بيوفيلم در مقادير مختلف مليتين از بين رفته بودند. نتيجه گيري: ميزان توليد بيوفيلم در سويه ها با همديگر متفاوت بود كه اين موضوع نشان مي دهد كه ميزان بيان ژن هاي توليدكننده بيوفيلم در بين سويه ها متفاوت است. نتايج تست تخريب بيوفيلم نشان داد كه با افزايش مقدار پپتيد تخريب بيشتري صورت مي گيرد كه مي تواند به دليل ايجاد منفذ در سطح بيوفيلم باشد. نتايج تست كشندگي پپتيد نشان داد كه مليتين مي تواند از بيوفيلم عبور كرده و آسينتوباكتر ها را از بين ببرد.

Background an‎d Objective Acinetobacter baumannii is a dangerous agent responsible for burn infection. Currently, antibiotic resistance is being increased and in these conditions, antimicrobial peptides have suggested to overcome this kind of infections. Accordingly, this study was aimed to evaluation of melittin peptide on degradation of biofilm produced by A. baumannii and killing effect of this peptide on bacteria in depth of biofilm. Materials an‎d Methods Melittin was purified from bee venom by Reverse-Phase HPLC. Biofilm producing ability of strains was evaluated by spectrophotometry. Then, degradation and killing effect of melittin on biofilm and bacteria were examined by spectrophotometry and culture method respectively. Results The results indicated that all strains have biofilm, production ability and the average of OD was estimated at 0.98. This average was dropped to 0.15 OD due to degradation of biofilm. The culture results showed that all bacteria were killed in different amounts of melittin. Conclusion The amount of biofilm production was varied among the bacteria. This issue pointed out to this fact that gene expression of biofilm related genes is different subsequently. Degradation of biofilm by melittin would be induced by pore formation in the surface of biofilm and this issue is boosted by increasing in peptide amount too. Killing ability of melittin on bacteria demonstrate that melittin can be able to penetrate across the biofilm and invade to bacteria.