پديد آورندگان :
عظيمي، آتنا دانشگاه اراك - گروه زيست شناسي، اراك , لطفي، بيان دانشگاه اراك - گروه زيست شناسي، اراك , مهديه، مجيد دانشگاه اراك - گروه زيست شناسي، اراك , سليماني مهرنجاني، ملك دانشگاه اراك - گروه زيست شناسي، اراك
كليدواژه :
اپيگالوكاتچينگالات , تمايز استئوژنيك , سلولهاي بنيادي مزانشيمي , رت
چكيده فارسي :
زمينه و هدف: اپيگالوكاتچينگالات به‌عنوان يك آنتياكسيدانت قوي نقش مهمي در مهار راديكال‌هاي آزاد ايفا مي‌كند. بنابراين هدف از اين پژوهش، بررسي اثر اپيگالوكاتچينگالات بر توانايي زيستي، مورفولوژي و تمايز استئوژنيك سلولهاي بنيادي مزانشيمي مغز استخوان موش صحرايي است.
روش كار: در اين مطالعه تجربي، سلولهاي بنيادي مزانشيمي مغز استخوان با استفاده از روش فلشينگ استخراج شدند. در پايان پاساژ سوم سلولها به 9 گروه كنترل و آزمايشي تقسيم شدند. سلولهاي گروه‌هاي آزمايشي با غلظتهاي مختلف اپيگالوكاتچينگالات (0، 1، 5، 10، 15، 20، 25، 30 و 50 ميكرومولار) براي يك دوره 21 روزه در محيط استئوژنيك حاوي 10 درصد سرم جنين گاوي تيمار شدند. سپس توانايي زيستي، ميزان معدني شدن ماتريكس استخواني، سطح كلسيم داخل و خارج سلولي، ميزان فعاليت آلكالين فسفاتاز و سطح بيان ژن‌هاي آلكالين فسفاتاز و استئوكلسين طي روند استئوژنزيس مورد بررسي قرار گرفت. داده‌ها با روش آماري آناليز واريانس يك‌طرفه مورد تجزيه و تحليل قرار گرفت و تفاوت ميانگين‌ها در سطح 05/0 P˂ معني‌دار در نظر گرفته شد.
يافته ها: توانايي زيستي، ميزان معدني شدن ماتريكس استخواني، سطح كلسيم، ميزان فعاليت آلكالين فسفاتاز و سطح بيان ژن‌هاي آلكالين فسفاتاز و استئوكلسين در سلولهاي بنيادي مزانشيمي تيمار شده با اپيگالوكاتچينگالات به‌طور معني‌داري در رفتاري وابسته به دوز، در مقايسه با گروه كنترل افزايش يافت (05/0 P˂). همچنين گستردگي سيتوپلاسم نيز در سلولهاي تيمار شده با اپيگالوكاتچينگالات مشاهده شد.
نتيجه‌گيري: از آنجاكه اپيگالوكاتچينگالات افزايش معني‌داري در توانايي زيستي و تمايز استئوژنيك سلولهاي بنيادي مزانشيمي ايجاد مي‌كند، بنابراين مي‌تواند براي افزايش تمايز و بقاي سلولي استفاده شود.
چكيده لاتين :
Background: Epigallocatechin gallat as a strong antioxidant plays an important
role in inhibiting free radicals. Therefore, this study aimed to investigate the effect
of Epigallocatechin gallat on the viability, morphology and osteogenic
differentiation in bone marrow mesenchymal stem cells of rat.
Methods: In this experimental study, the bone marrow mesenchymal stem cells
were extracted using flashing-out method. At the end of the third passage, cells
were divided into 9 groups of control and experimental. The cells of experimental
groups were treated with the different doses of epigallocatechin gallat (0, 1, 5, 10,
15, 20, 25, 30 and 50 μm) for a period of 21 days in the osteogenic media
containing 10% of fetal bovine serum. Then, cell proliferation, bone matrix
mineralization, intracellular and extracellular calcium deposition, alkaline
phosphatase activity and expression of alkaline phosphatase and osteocalcin genes
were investigated during the procedure of osteogenesis. Data was analyzed using
one-way ANOVA and the means difference was considered significant at p<0.05.
Results: The cell viability, mean bone matrix mineralization, calcium deposition,
alkaline phosphatase activity, expression of alkaline phosphatase and osteocalcin of
the mesenchymal stem cells treated with epigallocatechin gallat significantly
increased, compared to the control group in a dose dependent manner (p<0.05).
Also cytoplasm extensions were observed in the cells treated with epigallocatechin
gallat.
Conclusion: Since epigallocatechin gallat caused a significant increase in cell
viability and osteogenic differentiation in the mesenchymal stem cells, therefore, it
can be utilized in order to increase cell differentiation and survival
