بررسي تاثير عصاره‌ي آبي گرده‌ي نخل بر ميزان زنده ماندن و تكثير سلول‌هاي بنيادي اسپرماتوگوني موش نابالغ در محيط كشت

The effect of aqueous extract of Phoenix Dactylifera Pollen on In vitro viability and proliferation rate of neonatal mouse spermatogonial stem cells

زمينه و هدف: گرايش رو به رشد سريعي در مصرف دارو­هاي گياهي در كشور­هاي در حال توسعه وجود دارد. يكي از دارو­هاي سنتي كه براي درمان ناباروري مردان استفاده مي­شود گرده­ي نخل است. هدف از اين مطالعه بررسي تاثير عصاره­ي آبي گرده­ي نخل بر ميزان زنده ماندن و تكثير آزمايشگاهي سلول­هاي بنيادي اسپرماتوگوني موش نابالغ مي­باشد. مواد و روش‌ها: جداسازي تعليق سلولي شامل سلول­هاي سرتولي و سلول­هاي بنيادي اسپرماتوگوني ازبيضه­ي موش سوري شش تا ده روزه با دو مرحله هضم آنزيمي انجام شد. تعليق سلولي در محيط DMEM حاوي پنج درصد سرم در غياب و حضور غلظت هاي 06/0، 25/0 و 62/0 ميلي­گرم بر ميلي­ليتر عصاره­ي آبي گرده­ي نخل به مدت دو هفته كشت داده شد. به منظور ارزيابي رشد سلول­هاي بنيادي اسپرماتوگوني در انتهاي مرحله كشت، تعداد كل سلول­ها به عنوان شاخص تكثير سلولي و تعداد سلول­هاي زنده براي ارزيابي ميزان زنده ماندن سلولي در نظر گرفته شد. نتايج: درصد سلول­هاي زنده و تكثير سلولي پس از دو هفته كشت در گروه كنترل و گروه­هاي تيمار شده با غلظت­هاي 06/0، 25/0 و 62/0 ميلي­گرم بر ميلي­ليتر عصاره­ي آبي گرده­ي نخل تفاوت معني­داري با يكديگر نداشت (05/0 < P). نتيجه‌گيري: نتايج اين مطالعه نشان داد كه تيمار تعليق سلولي بيضه­ي موش نابالغ با عصاره­ي آبي گرده­ي نخل در محيط كشت، اثرات سمي بر ميزان زنده ماندن و تكثير سلولي اين سلول­ها نداشته است. بنابراين مي­توان از آن در مطالعات بعدي جهت بررسي روند كلوني­زايي سلول­هاي بنيادي اسپرماتوگوني در محيط كشت استفاده نمود

Introduction: There is a fast growing tendency in the consumption of herbal remedies in the developing countries. One of the traditional medicines used for male infertility is Date palm (Phoenix dactylifera) pollen (DPP). The goal of the present study was to investigate the effect of aqueous extract of DPP on In vitro viability and proliferation rate of neonate mouse spermatogonial stem cells (SSCs). Methods: cell suspension includes sertoli cells and SSCs were isolated from neonatal 6 day-old mice testes by 2 steps enzymatic digestion. The cell suspension was cultured in DMEM and FCS 4% in the absence or presence of 0.06, 0.25 and 0.62 mg/ml of aqueous extract of DPP for 2 weeks. In order to evaluate the rate of SSCs expansion at the end of culture, the mean number of whole cells and living cells were considered as proliferation and survival rates respectively. Data analysis was done with ANOVA test. The significancy of the data was analyzed using ANOVA and Tukey post test. Results: The results showed that there were no significant differences between the mean percent of viability and proliferation rate between control and 0.06, 0.25 and 0.62 mg/ml of DPP-treated groups (P> 0.05). Conclusion: Our study showed that treatment of neonatal mouse testicular cell suspension with DPP had no toxic effects on viability percent and proliferation rate of these cells. Thus, we can use DPP for evaluate the in vitro pattern of SSCs colonization in the future studies.