مقايسه آزمايش‌هاي الكتروكمي لومينسانس، وسترن بلات و PCR براي تائيد ويروس HTLV-1 در داوطلبان اهداي خون

سابقه و هدف ويروس لنفوتروپيك سلول T انساني نوعI ، با دو بيماري در انسان يعني لوكمي/لنفوم T بزرگسالان و پاراپارسيس اسپاستيك گرمسيري مرتبط است. حدود 5 تا 10 ميليون نفر با HTLV-1 در سراسر جهان آلوده شده‌اند. به منظور افزايش سلامت خون در گيرندگان و جلوگيري از نتايج كاذب در داوطلبان اهداي خون، نياز است روش‌هاي شناسايي عوامل عفوني، از حساسيت و اختصاصيت بالا برخوردار باشند. هدف از اين مطالعه؛ مقايسه آزمايش‌هـاي الكتروكمي لومينسانس، وسترن بلاتينگ و PCR ، براي تائيد ويروس HTLV-1 بود. مواد و روش‌ها اين مطالعه تجربي در سال 1397 بر روي تعداد 66 نمونه(62 مرد و 4 زن) كه با كيت الايزا داراي آنتي‌بادي عليه ويروس HTLV-1بودند و با روش‌هاي الكتروكمي لومينسانس و وسترن بلات آزمايش شدند، انجام شد. هم‌چنين جهت تشخيص ويروس با روش PCR ، اهداكنندگان خون مجدد فراخوان شدند و نمونه جديد از آنان اخذ شد. پس از استخراج DNA ، آزمايش Nested PCR با آغازگرهاي هر دو ناحيه TAX و LTR انجام شد. يافته‌ها در اين مطالعه تعداد 8 (12/1%) نمونه از 66 نمونه كه با آزمايش الايزا، مجدداً واكنش نشان داده بودند، انتخاب شدند. تعداد 4 (6%) نمونه با روش الكتروكمي لومينسانس، حاوي آنتي‌بادي عليه HTLV-1 بودند. در بررسي با روش‌هاي وسترن بلات و Nested PCR نيز، همان 4 (6%) نمونه مجدد مثبت شدند. نتيجه گيري استفاده از آزمايش‌هاي الكتروكمي لومينسانس، وسترن بلات و روش PCRكه در اين مطالعه نتايج مشابهي داشتند، براي تاييد ويروس HTLV-1 مناسب مي‌باشند.

Background and Objectives Human T-cell lymphotropic virus type I (HTLV-I) has been associated with two diseases in humans such as adult T-cell leukemia/lymphoma (ATLL) and HTLV-associated myelopathy/tropical spastic Para paresis (HAM/TSP). About 5 to 10 million people are infected with HTLV-1 worldwide. In order to improve the blood safety and to prevent false positive results in blood donors, methods for identifying infectious agents need to be highly sensitive and specific. The purpose of this study was to compare the electrochemical luminescence, western blotting, and PCR assays to confirm HTLV-1 virus. Materials and Methods This exprimental study was carried out in 2018 on 66 samples (62 males and 4 females) which had antibody against HTLV-1 virus. All retested samples with the same ELISA kit were examined by electrochemical luminescence and western blotting. For virus detection by PCR method, blood donors were recalled for new samples. After DNA extraction, nested PCR was performed with primers in both TAX and LTR regions. Results In this study 8 (%12/1) samples from 66 samples were reacted with ELISA test. Also 4 (%6) samples had antibody against HTLV-1 by electrochemiluminescence test. Finally, four samples were confirmed by Western blotting and Nested PCR. Conclusions The use of the electrochemical luminescence, western blotting and PCR assays, which had similar results in this study, is suitable for detection and confirmation of HTLV-1 virus.