بررسي اثر متفورمين بر آپوپتوز ناشي از پراكسيد هيدروژن در سلول هاي اندوتليال انساني جدا شده از سياهرگ بند ناف

Effect of metformin against hydrogen peroxide-induced apoptosis in human vascular endothelial cells

مقدمه: متفورمين يك داروي ضد ديابت است كه ممكن است يك گزينه درماني جديد براي مداواي آترواسكلروز باشد. مطالعه حاضر اثر محافظتي متفورمين را بر استرس اكسيداتيو ناشي از پراكسيد هيدروژن (H2O2) در سلول هاي اندوتليال انساني جدا شده از سياهرگ بند ناف HUVECs) يا (Human umbilical vein endothelial cells بررسي مي نمايد. روش‌­ها: سلول هاي اندوتليال به مدت 24 ساعت با متفورمين تيمار شده و سپس به مدت 2 ساعت در معرض پراكسيد هيدروژن با غلظت 0/5 ميلي مولار قرار گرفتند. زنده ماني سلول ها با استفاده از 3- ( 4و5 دي متيل تيازول 2 - ايل)- 2و5 - دي فنيل تترازوليوم برومايد (روش MTT) اندازه گيري شد. سطح گونه هاي فعال اكسيژن (ROS) با 2و7 دي كلرو دي هيدروفلورسين دي استات (DCF -DA) بررسي شد. ميزان پراكسيداسيون ليپيدي، گروه هاي تيول و ظرفيت آنتي اكسيداني تام (TAP) نيز مورد بررسي قرار گرفت. يافته‌ها: متفورمين در غلظت 20 ميكرومولار توانست آسيب سلولي ناشي از پراكسيد هيدروژن را جلوگيري نمايد. سطوح ROS و پراكسيداسيون ليپيدي در سلول هاي تحت درمان با پراكسيد هيدروژن افزايش يافت. متفورمين توانست به طور قابل ملاحظه اي سطح ROS و پراكسيداسيون ليپيدي را كاهش دهد. اين دارو همچنين توانست گروه هاي تيول و ظرفيت آنتي اكسيداني تام را افزايش دهد. نتيجه‌­گيري: متفورمين سلول هاي HUVECs را از استرس اكسيداتيو و آپوپتوز ناشي از پراكسيد هيدروژن محافظت مي كند.

Introduction: Metformin is an anti-diabetic drug, which may be a novel therapeutic option for treatment of atherosclerosis. The current study evaluates protective capacity of metformin in hydrogen peroxide (H2O2)-induced oxidative stress in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). Methods: Endothelial cells were treated with metformin for 24 h. Then they were treated with 0.5 mM H2O2 for 2h. Cell viability was measured by 3‑(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5‑diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. Reactive oxygen species (ROS) levels were measured using 2, 7 dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCF-DA) assay. Lipid peroxidation (LPO), total thiol groups and total antioxidant power (TAP) were also evaluated. Results: Metformin at concentration of 20 μM increased survival of HUVECs exposed to H2O2. ROS and MDA levels increased in H2O2-treated endothelial cells. Metformin could significantly decrease H2O2-induced ROS and MDA elevation. It also increased total thiol groups and TAP. Conclusion: Metformin protects HUVECs against the oxidative stress and apoptosis induced by H2O2.