بررسي بيوشيميايي انواع پروتئازهاي گوارشي اختصاصي در كفشدوزك Cryptolaemus montrouzieri Mulsant (Col.: Coccinellidae) و تاثير طعمه هاي مختلف بر فعاليت آنها

انواع و ويژگي هاي بيوشيميايي پروتئازهاي گوارشي در لاروها و افراد بالغ كفشدوزك شكارگر Cryptolaemus montrouzieri Mulsantبا استفاده از سوبستراها و بازدارنده هاي اختصاصي تعيين و تغيير فعاليت آنها پس از تغذيه روي طعمه هاي مختلف ارزيابي شد. كفشدوزك ها در شرايط آزمايشگاه پرورش يافته و با شپشك آرد آلود تغذيه شدند. تشريح بدن در محيط كلريد سديم انجام شد و لوله گوارش نمونه ها همگن و سانتريفيوژ شد. سپس فعاليت انواع پروتئازهاي گوارشي تحت تاثير سوبستراها و بازدارنده هاي اختصاصي و با تغذيه از سه ميزبان تعيين شد. نتايج نشان داد كه فقط سيستئين پروتئازها و اگزوپپتيدازها در معده افراد بالغ فعال بودند، اما در لاروها، سرين و سيستئين پروتئازها نيز در هضم نقش داشتند. بيشترين فعاليت سرين پروتئازهاي تريپسين، كيموتريپسين و الاستاز لاروها به ترتيب در اسيديته هاي 8، 89 و 9 به دست آمد. اسيديته بهينه فعاليت كاتپسين هاي B و L به ترتيب در مقادير 6 و 5 در لاروها و افراد بالغ كفشدوزك C. montrouzieriتعيين شد. بيشترين فعاليت آمينو و كربوكسي پپتيداز گوارشي لاروها در اسيديته 7 اندازه گيري شد، اما اين دو آنزيم در افراد بالغ به ترتيب در اسيديته هاي 7 و 6 بيشترين فعاليت را نشان دادند. بازدارنده هاي اختصاصي سيستاتين، E64، TLCK، SBTI، TPCK و AEBSF.HCL سبب كاهش معني دار فعاليت پروتئازهاي اختصاصي لاروها و افراد بالغ C. montrouzieriشدند. تفاوت معني داري در فعاليت سرين پروتئازها، اگزوپپتيدازها و كاتپسين L لاروهاي تغذيه شده از شپشك آردآلود مركبات Planococcus citri، شپشك آردآلود چاي Pseudococcus viburniو شته چاي Toxoptera aurantiiمشاهده نشد، اما سيستئين پروتئازها و آمينوپپتيداز افراد بالغ تغذيه شده از شته چاي كمترين فعاليت را از خود نشان دادند. تفاوت پروفايل پروتئازي در لاروها و افراد بالغ اين كفشدوزك مويد تفاوت فيزيولوژيك اين دو مرحله زيستي و اهميت سرين پروتئازها در فرآيندهاي حفظ و نگهداري شرايط رشدي دستگاه گوارش است. علاوه براين، فعاليت بيشتر سيستئين پروتئازها در افراد بالغ به ماهيت طعمه مصرف شده و وجود تركيبات مختلف پروتئيني و حتي گليكوپروتئيني در طعمه ها باز مي گردد.