ارزيابي كمي و كيفي سلول‌ها در چند محصول تجاري پروبيوتيك و بررسي تاثير شرايط انبارماني بر زنده‌ماني و قابليت كشت مخمر پروبيوتيك

Quantitative and qualitative assessment of cells in several commercial probiotic products and evaluation of storage conditions on cell culturability and viability of a probiotic yeast

يكي از معيارهاي مهم براي تعيين كيفيت محصولات حاوي پروبيوتيك ­ها، حضور تعداد مشخصي از سلول­ هاي زنده در هر گرم از محصول است. براي انتقال تعداد كافي از سلول­ هاي زنده به دستگاه گوارش، بايد جمعيت ميكرو ارگانيسم ­هاي پروبيوتيك طي دوره انبارماني، حفظ شود. در مطالعه حاضر، در ابتدا جداسازي و شمارش سلول­ هاي زنده در چند محصول پروبيوتيك با استفاده از روش ­هاي شمارش در پليت و فلوسيتومتري انجام شد. سپس جدايه ­ها با روش­ هاي بيوشيميايي و مولكولي شناسايي شدند. همچنين تاثير دماهاي مختلف نگهداري طي 30 روز بر زنده­ ماني مخمرهاي پروبيوتيك با روش­ هاي مذكور، ارزيابي شد. نتايج نشان داد كه تعداد و نوع سويه جدا شده از يك نوع پروبيوتيك تجاري، ساشه پروتكسين ريستور، با تعداد و نوع سويه درج شده بر روي محصول مطابقت داشت، اما تعداد سلول­ هاي قابل كشت كپسول پروتكسين بالانس و محصول ديليست با ميزان جمعيت ادعا شده بر روي محصول مطابقت نداشت. در زمينه نتايج شمارش مخمرها نكته قابل توجه اين بود كه تنها 37 درصد سلول­ ها قابليت كشت بر روي محيط كشت YPG آگار داشتند، در حاليكه بررسي زنده­ ماني سلول­ ها بر اساس انسجام غشاي سيتوپلاسمي، حاكي از زنده ­ماني بيش از 87 درصد سلول ­ها بود. سلول­ هاي مخمري ديليست، پايداري مطلوبي در محدوده دمايي 35- و 4 درجه سلسيوس نشان دادند. براين اساس مي­ توان نتيجه گرفت كه استفاده از روش ­هاي­ مختلف كشت و همچنين استفاده از شرايط فيزيكوشيميايي متفاوت مي ­تواند بر نتايج جداسازي و شمارش ميكرو ارگانيسم­ ها تاثير بسيار زيادي داشته باشد، در نتيجه استفاده از روش ­هاي مختلف جهت حصول به نتايج صحيح الزامي است.

One of the essential criteria for determining the quality of products containing probiotics is the presence of a certain number of viable cells per gram of product. To transmit enough viable cells to the gastrointestinal tract, the population of probiotic microorganisms should be preserved during storage. In the present study, culturable cells of some commercial products were isolated and enumerated by the plate count and flow cytometric methods. The isolates were then identified by biochemical and molecular methods. The viability of yeast cells was then assessed at different temperatures during 30 days by the methods above. The results showed that Protexin restore® contained the same types and number of bacteria that were claimed by the manufacturer. In contrast, protexin balance® and Dailyeast® contained a lower number of bacterial cells and yeast cells, respectively. It is noteworthy that only 33% of yeast cells were culturable on YPG agar, while flow cytometric analysis showed that 87% of cells were viable and exhibited cell membrane integrity. Also, yeast cells in Dailyeast® product were stable at 4-35°C. In conclusion, using different culture media and physicochemical conditions for the enumeration of viable and culturable cells may lead to different results. Thus, a combination of different methods should be used to get good results.