عنوان مقاله :
رديابي باكتريوسين گروه IIa و IIb در سويه‌هاي بومي لاكتوباسيلوس جداسازي شده از محصولات لبني سنتي
عنوان به زبان ديگر :
Tracing of IIa and IIb bacteriocins in native strains of Lactobacillus isolated from traditional dairy products
پديد آورندگان :
پورعبدي سرابي، پريسا دانشگاه شهيد مدني آذربايجان، تبريز - دانشكده كشاورزي - گروه بيوتكنولوژي كشاورزي , تاري نژاد، عليرضا دانشگاه شهيد مدني آذربايجان، تبريز - دانشكده كشاورزي - گروه بيوتكنولوژي كشاورزي , حجازي، محمدامين سازمان تحقيقات، آموزش و ترويج كشاورزي، تبريز - پژوهشگاه بيوتكنولوژي كشاورزي ايران - پژوهشكده بيوتكنولوژي صنايع غذايي , مجيدي، محمد دانشگاه شهيد مدني آذربايجان، تبريز - دانشكده كشاورزي - گروه بيوتكنولوژي كشاورزي
كليدواژه :
رديابي , زيرهم چيني , پروبيوتيك , باكتريوسين
چكيده فارسي :
باكتري هاي اسيدلاكتيك، مولكول هاي پروتئيني ضد باكتريايي باكتريوسين با منشأ ژنتيكي متنوع توليد مي‌كنند. بنابراين، شناسايي رده باكتريوسيني اين باكتري‌ها، مي‌تواند منجر به درك درستي از عملكرد ضد باكتريايي اين پپتيدها شود. هدف از اين پژوهش غربالگري باكتريهاي اسيدلاكتيك بومي مولد باكتريوسين‌هاي زيرگروه IIa و IIb بود. ابتدا جدايههاي با ويژگي ضد باكتريايي عليه دو باكتري شاخص ليستريا اﯾﻨﻮﮐﻮا (Listeria innocua)و اشريشيا كولاي (Escherichia coli) با استفاده از آزمون انتشار از ديسك غربالگري شدند. وزن مولكولي پپتيدهاي ترشح‌شده از باكتريهاي اسيدلاكتيك در محيط كشت با روش ترسيب سولفات آمونيوم تخمين زده شد. براي شناسايي جدايههاي لاكتيكي مولد باكتريوسين از تواليهاي بالادستي و پايين‌دستي ژن ساختاري باكتريوسين در واكنش زنجيرهاي پليمراز استفاده گرديد. پنج جدايه اسيدلاكتيك با بيشترين قطر هاله عدم رشدي عليه دو باكتري شاخص گزينش و وزن مولكولي پپتيدهاي ترشح‌شده توسط اين سويه‌ها كمتر از 10 كيلودالتون برآورد گرديد. توالي‌يابي محصول واكنش زنجيرهاي پليمراز منجر به شناسايي مناطق ژني plnN،plnJK وplnEF در جدايه N و مناطق ژني plnJK وplnEF در جدايه M گرديد. بنابراين، جدايه M و N داراي باكتريوسين گروه IIb بوده و از قابليت خوبي براي استفاده در افزايش سطح كيفي فراوردههاي لبني و غذاي دام برخوردار ميباشند. نتايج زير هم‌چيني تواليهاي به‌دست‌آمده نشان داد كه سويه‌هاي بومي موجود در ايران تشابه بسيار بالايي (99 درصد) با لاكتوباسيلوس پلانتاروم (Lactobacillus plantarum) سويه‌هاي FQ و ATCC BAA-793 دارد. در صورت انجام آزمايش‌هاي تكميلي در ارتباط با جداسازي باكتريوسين‌هاي موجود در سويه‌هاي بومي M و N، مي‌توان از اثر مهاري آن‌ها عليه باكتريهاي بيماري‌زاي غذايي استفاده نمود.
چكيده لاتين :
Lactic acid bacteria produce bacteriocin as antibacterial protein molecules with diverse genetic origins. Therefore, identifying the bacteriocin class of native lactic acid bacteria could lead to an understanding of the antibacterial function of these peptides. In this study, the presence of two subgroups of bacteriocins (IIa and IIb) in the native strain of Lactic acid bacteria was investigated. After the screening of these strains against two Index microorganisms including Listeria innocua (ATCC 33090), and Escherichia coli (ATCC 1399) by disk diffusion assay, the five strains with the highest diameter of growth inhibitory against these index pathogens were selected. The molecular weight of peptides secreted by lactic acid bacteria was estimated by ammonium sulfate precipitation. Upstream and downstream sequences of the bacteriocin structural gene were used to identify bacteriocin-producing lactic isolates in the polymerase chain reaction. The results of SDS - PAGE showed bands with a molecular weight of less than 10 kDa for these strains. Sequencing of the polymerase chain reaction product led to the identification of plnN, plnJK, and plnEF gene regions in N isolate and plnJK and plnEF gene regions in M isolate. Therefore, isolates M and N have good potential for use in increasing the quality level of dairy products and animal feed. The multalign results of sequences showed that the native strains in Iran are very similar (99%) with Lactobacillus plantarum FQ and ATCC BAA-793 strains. In case of additional experiments related to the isolation of bacteriocins present in native strains M and N, their inhibitory effect against foodborne pathogens can be used.
عنوان نشريه :
بهداشت مواد غذايي
