تاثير عصاره جلبك سبز Spirogyra sp. بر ميزان ترشح آنزيم پكتيناز و سطح بيان ژن PgaA در قارچ Aspergillus niger

Effect of green algae extract; Spirogyra sp. on the rate of pectinase enzyme secretion and expression level of PgaA gene in Aspergillus niger

. قارچ Aspergillus nigerميكروارگانيسمي است كه آنزيم هاي گروه پكتيناز را در سطوح بالايي توليد مي كند. در اين قارچ ژن هاي PgaA خانواده شماره 28 گليكوزيد هيدروزلازها كه آنزيم هاي پلي گالاكتوروناز ترشح مي كنند را كد مي كنند. جلبك هاي سبز و جلبك هاي سبز-آبي با داشتن تركيبات پكتيني، سلولزي و همي سلولزي زايلان، آرابينوزايلان و غيره در ساختار خود مي توانند به عنوان پيش ماده براي توليد آنزيم هاي سلولاز، زايلاناز و پكتيناز در قارچ ها عمل نمايند. در اين پژوهش تاثير غلظت هاي 500 و 1000 ميكروگرم در ميلي ليتر عصاره جلبك سبز Spirogyra sp. بر ميزان ترشح آنزيم پكتيناز و همچنين سطح بيان ژن PgaA در بازه هاي زماني چهار و هشت روز پس از افزودن عصاره جلبك به محيط كشت، با استفاده ازتكنيك Quantitative Real-time PCR ارزيابي گرديد.. بيشترين ميزان ترشح آنزيم در روز هشتم پس از اضافه كردن عصاره جلبك با غلظت 100 ميلي گرم در ميلي ليتر به محيط كشت مشاهده شد (28/4 واحد بر ميلي ليتر). آناليز بيان ژن PgaA نشان داد كه بيشترين ميزان سطح بيان ژن مربوط به بازه زماني 4 روز بعد از افزودن عصاره جلبك به محيط كشت با غلظت 1000 ميكرو گرم ر ميلي ليتر بوده است:.با توجه به تاثير مثبت تركيبات جلبك اسپيژوژير بر ميزان بيان ژن رمز كننده آنزيم هاي پكتيناز و افزايش ترشح آنزيم چنين نتيجه گيري مي شود كه ميكروجلبكها مي تواننند منابع بسيار مناسبي جهت توليد آنزيم از قارچ هاي مستعد باشند و در صنايع بيوتكنولوژي مورد استفاده قرار گيرند

Aspergillusniger is one of the microorganisms that produce the pectinase enzymes group of the at high levels. In this fungus, PgaA genes code Glycoside hydrolase family 28 that secrete polygalacturonase enzymes. Green algae (Chlorophyceae) and blue-green algae (Myxophyceae) having pectin, cellulose and hemicellulose compounds such as xylan, arabinoxylan in their structure could act as a precursor to the production of cellulase, xylanase and pectinase enzymes in fungi. In this work, the effect of green algae extract ; Spirogyra sp. at 500 and 1000 mg/mL concentration on the rate of pectinase enzyme secretion and the relative expression of PgaA gene at 4 and 8 day after adding algae extract to culture medium was evaluated using qRT-PCR analysis. . The highest level of enzyme secretion was observed at 8th days after algae extract adding to culture medium at 1000 mg/mL concentration( 4.28 U/ml). Gene expression analysis of PgaA gene showed that the highest expression level was relted to 4th days time interval after adding alge extract at 1000 mg.mL (10/142). According to positive effect of spirogyra algae compounds on expression level of PgaA gene responsible to pectinase production and increase of enzyme secretion, it is concluded that microalgaes could be used as important sources of enzyme production from favorable fungi and could be useful in biotechnological industry