اثر سينرژيك عصاره گياه هندوانه ابوجهل(Citrullus colocynthis) و فيكوسيانين بر القاي مرگ برنامه ريزي شده در دودمان سلولي سرطان كولون انساني(HT-29)

The Synergic effect of Abujahl watermelon extract (Citrullus colocynthis) and Phycocyanin on apoptosis inducton in human colon cancer cell line (HT-29)

سرطان كولون يكي از مهمترين بدخيمي هاي شايع و از عوامل عمده مرگ و مير مي باشد. امروزه به استفاده از عصاره هاي گياهي مانند فيكوسيانين و عصاره هندوانه ابوجهل (Citrullus colocynthis) در درمان اين بيماري توجه بسياري شده است. در اين مطالعه تاثير سينرژيك عصاره C. colocynthis و تركيب فيكوسيانين بر رشد رده سلولي سرطان كولون و بيان ژنهاي caspase-8 و Bcl2 بررسي شد. پس از تيمار رده سلولي سرطان كولون انساني (HT-29) در زمان هاي (24، 48 و 72 ساعت) با غلظت‌هاي مختلف عصاره و فيكوسيانين و همچنين تيمار همزمان اين دو ماده، درصد سلولهاي زنده با روش MTT محاسبه و بيان ژن هاي caspase-8 و Bcl2 با روش real time PCR سنجش گرديد. بيشترين مهار رشد رده سلول هاي سرطاني پس از تيمار هر دو ماده با غلظت هاي بالا مشاهده گرديد. تفاوت معني داري بين زمان هاي مختلف تيمار تنها در غلظت هاي پايين (1و2 g/ml) مشاهده شد. عصاره و فيكوسيانين به ترتيب موجب كاهش27/10 و 22/5 برابري بيان ژن Bcl2 گرديد. همچنين تيمار همزمان عصاره و فيكوسيانين با كاهش 31/7 برابري بيان اين ژن همراه بود. عصاره C. colocynthis بيان ژن Caspase-8 را 2/3 برابر افزايش داد. عصاره و تركيب عصاره و فيكوسيانين با افزايش قويتر بيان ژن Caspase-8 و از طرفي فيكوسيانين و تركيب عصاره و فيكوسيانين با كاهش قويتر بيان ژن Bcl2، سبب القاء مرگ برنامه ريزي شده در رده سلولي سرطان كولون انساني (HT-29) شدند.

Colorectal Cancer is one of the most common malignancies and is one of the mojor causes of mortality. Todayes, researchers pay attention to use of herbal extracts, including phycocyanin and Citrus colocynthis extract for treatment of colon cancer. In this study the synergic effect of these compoundson colon cancer cells growth and expression of caspase-8 and Bcl2 genes was assessed. After treatment of human colon cancer cells (HT-29) in differnet times (24, 48 & 72h) and with different concentrations of aqueous and phycocyanin watermelon extract and also combination of aqueous extract and phycocyanin, percentage of live cells was calculated using MTT method. Then expression of caspase-8 and Bcl2 genes were measured by real-time PCR. The highest inhibition of growth of cancer cells was observed after treatment with high concentration of both compounds. In addition, significant differences were observed between the different treatment times with low concentration (1 and 2 g/ml). The aqueous extractand phycocyanin reduced the expression of Bcl2 gene by about 10.27 and 5.22, respectively. However, the combination of extract and phycocyanin was associated with a decrease of 7.31% in expression of this gene. The extract increased the expression of Caspase-8 gene by 2.3 fold. Citrus colocynthis extract induces apoptosis by strongly increasing the expression of caspase-8 gene. Additionally, the phycocyanin and the combination of extract and phycocyanin strongly decreased the expression of Bcl2 gene. Phycocyanin and extract and Phycocyanin combination had stronger anti-cancer effects than extract alone.