شناسايي سويه هاي باكتريايي مقاوم به كروم از فاضلاب پالايشگاه نفت كرمانشاه با استفاده از توالي يابي واكنش زنجيره‌ي پليمراز 16S rDNA و بررسي رشد باكتري‌هاي مقاوم در غلظت-هاي مختلف كروم

Identification of the resistant bacterial strains from Kermanshah oil wastewater based on molecular 16S rDNA PCR ssequencing and the investigation of their growth in different chromium concentration

هدف از مطالعه حاضر بررسي شناسايي سويه‌هاي مقاوم باكتريايي جدا شده از فاضلاب پالايشگاه نفت كرمانشاه با استفاده از توالي يابي واكنش زنجيره‌ي پليمراز 16S rDNA از جهت شناسايي بهترين سويه با بزرگترين ميزان حذف كروم از طريق زيست پالايي و بررسي رشد باكتري‌هاي مقاوم در غلظت‌هاي مختلف كروم بود. در اين مطالعه 94 نمونه از فاضلاب پالايشگاه جمع‌آوري شد. باكتري‌ها با استفاده از مورفولوژي، رنگ آميزي گرم، تست‌هاي بيوشيميايي و آزمون‌هاي ميكروبيولوژي استاندارد تشخيص داده شدند، جداسازي شدند و با كروم شش ظرفيتي در غلظت‌هاي 25، 50، 100 و 150 ميلي‌گرم/ميلي‌ليتر براي 96 ساعت در يك شيكر اوربيتال انكوبه شدند. بزرگترين پالايش زيستي (35/0 ميليون در قسمت) در دماي 28 درجه‌ي سانتيگراد و pH در محدوده‌ي 00/8-50/7 مشاهده شد. نياز زيستي اكسيژن در محدوده‌ي 126 تا 530 بود. بيشترين ايزوله‌ها داراي نياز شيميايي اكسيژن در محدوده‌ي 20/7 تا 90/7 بودند. بيشتر ايزوله‌ها (30/53%) داراي نياز اكسيژني بين 80/7 تا 90/7 بودند. بر اساس نتايج اين مطالعه، سويه‌هاي Klebsiella variicola, Bacillus aerius، Lysinibacillus fusiformis وBacillus stratosphericus گونه‌هاي مقاومي بودند. رشد باكتري‌هاي به‌ترتيب در تيمارهاي كنترل، 25، 50، 100 و 150 ميلي‌گرم بزرگتر بود. تمام باكتري‌ها از 72 ساعت به بعد روال ثابتي از رشد را نشان دادند. با در نظر گرفتن مقاومت زياد سويه‌هاي Klebsiella variicola, Bacillus aerius, Bacillus stratosphericus وLysinibacillus fusiformis اين سويه‌ها مي‌توانند براي زيست پالايي كروم و كاهش آلودگي‌ها در محيط‌هاي آلوده به كروم، خصوصا پالايشگاه‌هاي نفت استفاده شوند.

The present study was conducted to identify the resistant bacterial strains from Kermanshah oil wastewater based on molecular 16S rDNA PCR sequencing and the investigation of their growth in different chromium concentration. To identify 16S rDNS, 94 samples were isolated from Kermanshah oil wastewater. Sequencing the best strain for most removal was conducted. Bactria were identified by morphology, Gram staining, Biochemical tests, Standard microbiology. Cr (VI) was incubated in the concentrations of 25, 50, 100 and 150 mg/ml for 96 h. The maximum Cr biosorption (0.35 ppm) was observed at 28°C and a pH=7.5-8. Biological oxygen demand was 126-530. The most isolates had a need from 7.2-7.90 for chemical oxygen demand. Based on obtained results, Klebsiella variicola, Bacillus aerius, Bacillus stratosphericus and Lysinibacillus fusiformis were most resistant strains. Bacteria growth was higher in control, 25, 50, 100 and 150 mg, respectively. All the bacteria showed a fix growth after 72h. Considering high resistant of Klebsiella variicola, Bacillus aerius, Bacillus stratosphericus and Lysinibacillus fusiformis, the strains can be used for bioremediation of chromium and decreasing aontaminations, especially in oil refinery.